細(xì)胞接受后的處理:
1) 收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的的*培養(yǎng)基。
4) 如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代。
5) 接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
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產(chǎn)品名稱 | 小鼠畸胎瘤細(xì)胞 |
英文名稱 | F9 |
規(guī)格 | 詳見說明 |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
注意事項:
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
腺苷酸環(huán)化酶9抗體
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
EPHA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphA4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-乙酰-L-蛋酸shēng huà shì jì容量:RT,避光25克
人神經(jīng)細(xì)胞HNS-(2-安基)溴化異流脲鎓輕溴醋鹽 2-(2-cminoqthyl)isothiourqc dixy7nobromidq 26-10-0
HL-60/Ad細(xì)胞,人白血病阿霉素耐藥株 小鼠單核巨噬細(xì)胞,J774A.1細(xì)胞 尿道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基UCM藍(lán)色葡聚糖2000shēng huà shì jì容量:保存:-20℃1克
MDA-MB-468-06(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2Hugh-Leifson培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:25毫升
AtT-20(小鼠垂體瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R099大鼠表皮色素細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0904701-97-33-環(huán)己基Cyclohexanepropionic acid
RKO(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2雷公藤甲素(標(biāo)準(zhǔn)品)Triptolide質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Gibco 17005042 Keratinocyte-SFM (1X), Liquid(10724-011和37000015) 500ml雷公藤內(nèi)酯酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Triptonide質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人腎系膜細(xì)胞cDNAHRMC cDNA類葉升麻苷,毛蕊花糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Acteoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CXCL16 Others Rat 大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 利卡靈-B(標(biāo)準(zhǔn)品)(-)-Licarin B質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL利血平(標(biāo)準(zhǔn)品)Reserpine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠畸胎瘤細(xì)胞801-D (人巨細(xì)胞性肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2地瑞那韋乙醇鹽質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRDarunavir Ethanolate
HBdSMC-c 人類膀胱平滑肌細(xì)胞(HBdSMC) 500,000cells 原代內(nèi)皮細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml維拉佐酮質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRVilazodone
超氧化物歧化酶分析試劑盒SOD硝唑尼特質(zhì)量規(guī)格:>99%Nitazoxanide
CD274 Others Rat 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硝唑尼特(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Nitazoxanide
人十二脂腸腺癌;HuTu-80寡霉素A質(zhì)量規(guī)格:>95%,美國進(jìn)口原裝Oligomycin A
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