載體蛋白偶聯(lián)-多肽偶聯(lián)技術(shù)

肽-載體蛋白銜接多用于制備抗毒素類抗體，單獨(dú)的單個(gè)通常通常小小的不足以激起充分的免疫反應(yīng)，而帶有很多抗原表位的載體蛋白有利于刺激輔助性T細(xì)胞，進(jìn)一步誘導(dǎo)B細(xì)胞免疫反應(yīng)。

合生生物偶聯(lián)蛋白主要如下幾種：

KLH（Keyhole Limpet Hemocyanin），即血藍(lán)蛋白，由于KLH比BSA有更高的免疫原性，因此是常被替換的載體蛋白。

BSA（牛血清白蛋白），即牛血清白蛋白，屬于十分穩(wěn)定的和可溶的白蛋白。BSA的不利之處在于在很多實(shí)驗(yàn)中，它被當(dāng)作封閉劑使用，如果多肽-BSA偶聯(lián)物的抗血清用于這樣的檢測(cè)分析中，通常會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性，因?yàn)檫@些血清含有抗BSA的抗體。

OVA（Ovalbumin），即雞卵白蛋白，它可作為第*二載體蛋白去驗(yàn)證抗體是否僅針對(duì)靶向而并非載體蛋白（如BSA）。

所有可攜帶的基基反應(yīng)的功能基團(tuán)經(jīng)修飾都可被替換為發(fā)生共軛反應(yīng)。合生生物偶聯(lián)反應(yīng)，其中十分常見(jiàn)的有以下幾種：

碘乙酰胺（碘乙酰胺）

馬來(lái)?yè)诫s（馬來(lái)酰亞胺）

烷基鹵（鹵代烷）

MAPs分支肽-多肽偶聯(lián)技術(shù)

多種抗原肽（MAP）是人工分支的肽，其中Lys殘基用作支架核心，以支持形成具有不同或相同肽序列的≤8個(gè)分支。

多種抗原肽已被用于生產(chǎn)用于免疫學(xué)研究的抗體。MAP具有高的肽抗原與核心分子摩爾比，并且不需要載體蛋白來(lái)

引發(fā)抗體應(yīng)答。

自然界中沒(méi)有已知的分支蛋白，合生生物通過(guò)化學(xué)連接策略解決了這個(gè)問(wèn)題，該策略可以提高產(chǎn)率生產(chǎn)所需的肽樹(shù)狀大

分子。然后，分支結(jié)構(gòu)可以形成分子量增加的蛋白質(zhì)以引發(fā)免疫原性應(yīng)答。

MAP與帶有載體蛋白的肽

在支鏈賴氨酸上合成四或八個(gè)拷貝的肽；因此，MAP肽的作用類似于大蛋白。

MAP肽直接與佐劑一起注射以產(chǎn)生抗體。不需要載體蛋白。

MAP技術(shù)有利于N末端或內(nèi)部肽，因?yàn)樵撾耐ㄟ^(guò)C末端連接。相反，KLH-結(jié)合傾向于C-末端肽。但是，KLH載體可能會(huì)

引起空間位阻。

由于MAP肽的結(jié)構(gòu)，其滴度可能比KLH綴合的肽略高。MAP設(shè)計(jì)大大程度地提高了抗原濃度，因?yàn)楹铣傻碾目乖妓?/span>

產(chǎn)品總重量的95％。

使用MAP，每次都可以使用已知量的肽進(jìn)行免疫，從而可以更好地控制實(shí)驗(yàn)條件。