生物安全柜是為操作原代培養(yǎng)物、菌毒株以及診斷性標本等具有感染性的實驗材料時,用來保護操作者本人、實驗室環(huán)境以及實驗材料,使其避免暴露于上述操作過程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設計的。
今天我們將從使用原理、類別、功能等多個角度聊一聊生物安全柜的那些事兒。
防止操作者和環(huán)境暴露于實驗過程中產(chǎn)生的生物氣溶膠的負壓過濾排風柜,是防止實驗室獲得性感染的主要設備。
將柜內(nèi)空氣向外抽吸,使柜內(nèi)保持負壓狀態(tài),通過垂直氣流來保護工作人員;外界空氣經(jīng)高效空氣過濾器過濾后進入安全柜內(nèi),以避免樣品被污染;柜內(nèi)的空氣也經(jīng)過過濾器的過濾后再排到大氣中,以保護環(huán)境。
可保護工作人員和環(huán)境而不保護樣品,其氣流原理和實驗室通風櫥基本相同,不同之處在于排氣口安裝有HEPA 過濾器,將外排氣流過濾進而防止微生物氣溶膠擴散造成污染。一級生物安全柜本身無風機,依賴外接通風管中的風機帶動氣流,由于不能保護柜內(nèi)產(chǎn)品,目前已較少使用。
目前應用廣泛的柜型,按照《中華人民共和國醫(yī)藥行業(yè)標準YY0569-2005生物安全柜》中的規(guī)定,依照入口氣流風速、排氣方式和循環(huán)方式可分為4個級別:
A1型,A2型,B1型和B2型,所有的都可提供工作人員、環(huán)境和產(chǎn)品的保護,A1型安全柜前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.38m/s。無內(nèi)部循環(huán)氣流,99%的氣體通過排氣口過濾排出。
A2型安全柜前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.5m/s。70%氣體通過HEPA過濾器再循環(huán)至工作區(qū),30%的氣體通過排氣口過濾排出。
二級B型生物安全柜均為連接排氣系統(tǒng)的安全柜:連接安全柜排氣導管的風機連接緊急供應電源,目的在斷電下仍可保持安全柜負壓,以免危險氣體泄漏如實驗室。其前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.5m/s(100fpm)。
B1型70%氣體通過排氣口HEPA過濾器排除,30%的氣體通過供氣口HEPA過濾器再循環(huán)至工作區(qū)。
B2型為99%全排型安全柜,無內(nèi)部循環(huán)氣流,可同時提供生物性和化學性的安全控制,可以操作揮發(fā)性化學品和揮發(fā)性核放射物作為添加劑的微生物實驗。
為生物安全防護等級為4級實驗室而設計的,柜體*氣密,工作人員通過連接在柜體的手套進行操作,俗稱手套箱(Golve box),試驗品通過雙門的傳遞箱進出安全柜以確保不受污染,適用于高風險的生物試驗,如,進行SARS、埃博拉病毒相關實驗等;
根據(jù)生物安全柜的強制性行業(yè)標準規(guī)定,只有獲得國家食品頒發(fā)的三類科研注冊證的產(chǎn)品才能真正保護操作人員、實驗室環(huán)境和操作樣本;生物安全柜提供對人/樣品及環(huán)境的三重保護。
1.安裝:確保安全柜與外部排風系統(tǒng)壓力平衡,保證安全柜處于正常工作狀態(tài)
2.維護:定期維護和檢測,確保安全性
3、制定計劃:工作前認真理解操作步驟和所需設,盡量減少擾動,準備好消毒劑
4、開始:關紫外燈,前窗開至適當高度,打開安全柜的燈和風扇;檢查出風口是否有障礙物,等待5min;用消毒液*洗凈手和手臂;穿長袖工作服和手套;帶防護眼鏡
5、清潔:用70%的乙醇或適當?shù)南緞┎潦霉ぷ鲄^(qū)域內(nèi)壁
6、上樣:只放入所需物品,不能超載;出風口不要有障礙物,大物體間要保持一定距離;前窗降至適當高度,2-3min以吹掃污染物
7、最后的吹掃:工作結(jié)束,繼續(xù)開機10-15min
8、下樣:與污染物接觸的物品,取出之前必須經(jīng)表面去污處理,所有托盤或容器取出前必須加蓋
9、清潔:用消毒劑清潔內(nèi)壁,待其干燥;定期抬起工作面清潔下面的區(qū)域。
10、技巧:
•所有物品離前窗至少2英寸,所有污染性的操作盡量遠離工作區(qū)域的后部
•干凈的與污染的物品分開放置;污染物品盡量放置在工作區(qū)域后部
•操作時物品和手臂不要穿過前窗
•避免使用明火,用適當?shù)臏缇胧?bull;避免使用干擾安全柜內(nèi)層流的實驗手段
•安全柜處于操作狀態(tài)時,*消毒內(nèi)壁
操作者:生物安全柜如果使用不當,其防護作用就可能大大受到影響。
紫外燈:生物安全柜中不需要紫外燈。如果使用紫外燈的話,應該每周進行清潔,以除去可能影響其殺菌效果的灰塵和污垢。
明火:在生物安全柜內(nèi)所形成的幾乎沒有微生物的環(huán)境中,應避免使用明火。
溢出:實驗室中要張貼如何處理溢出物的實驗室操作規(guī)則,每一位使用實驗室的成員都要閱讀并理解這些規(guī)程。
清潔和消毒:由于剩余的培養(yǎng)基可能會使微生物生長繁殖,因此在實驗結(jié)束時,包括儀器設備在內(nèi)的生物安全柜里的所有物品都應清除表面污染,并移出安全柜。
除污染:生物安全柜在移動以及更換過濾器之前,必須清除污染。