革新性成像平臺
ECLIPSE Ti2實現(xiàn)了的25mm視野(FOV),改變您的觀察方式。憑借突破性的大視野,Ti2可以隨心所欲地利用大靶面CMOS相機的傳感器區(qū)域,并顯著提高了數(shù)據(jù)采集量。
為超高分辨率成像系統(tǒng)量身打造的Ti2載物臺表現(xiàn)極其穩(wěn)定、毫無偏移,同時其的硬件觸發(fā)功能可以輕松駕馭最嚴苛的高速成像實驗。Ti2的智能模塊可收集內(nèi)部傳感器數(shù)據(jù),引導(dǎo)用戶完成成像流程,杜絕誤操作。此外,在數(shù)據(jù)采集期間,將自動記錄各個傳感器的狀態(tài),最終實現(xiàn)高質(zhì)量成像,提高數(shù)據(jù)重現(xiàn)性。
結(jié)合尼康強大的圖像采集和分析軟件NIS-Elements,Ti2當之無愧為成像領(lǐng)域的革新。
| 突破性大視野
隨著研究趨勢朝著大規(guī)模、系統(tǒng)級方式發(fā)展,市場對于更快數(shù)據(jù)采集、更高通量的能力的需求與日俱增。大靶面相機傳感器的發(fā)展和電腦數(shù)據(jù)處理能力的提高推動了這樣的研究趨勢。憑借的25mm視野,Ti2提供更高級別的可量測性,令研究人員真正限度地發(fā)揮大靶面檢測器的作用,確保其核心成像平臺在相機技術(shù)不斷快速發(fā)展的情況下適應(yīng)未來需求。
神經(jīng)元微管染色(Alexa Fluor 488);使用CFI Plan Apo lambda 60x物鏡和DS-Qi2相機拍攝。上圖為傳統(tǒng)視野,下圖為Ti2的全新視野。
照片由西北大學(xué)尼康成像中心Josh Rappoport提供;
標本由西北大學(xué)S. Kemal、B. Wang和R. Vassar提供。
| 大視野的明場照明
高功率LED 在Ti2的大視野內(nèi)提供明亮的照明,確保在高倍率微分干涉差(DIC)等嚴苛要求下帶來清晰、一致的結(jié)果。采用復(fù)眼透鏡設(shè)計,Ti2能夠提供從一邊到另一邊的均勻照明。這對于定量的高速成像和大圖拼接都大有裨益。
高功率LED照明器
內(nèi)置復(fù)眼透鏡
我們?yōu)榇笠曇俺上裨O(shè)計了專門的緊湊的落射熒光照明器。它配有石英材質(zhì)的復(fù)眼照明透鏡,并能提供包括紫外在內(nèi)的廣譜的高透過率。硬鍍膜的大尺寸熒光濾塊能夠提供大視野的圖像,同時保證高信噪比。
大視野落射熒光照明器
大尺寸熒光濾塊
| 大直徑的觀察光路
觀察光路直徑的擴大,使得成像端口可以做到視場數(shù)25。由此得到的大視野能夠拍攝大約傳統(tǒng)透鏡兩倍的區(qū)域,使得用戶可以充分發(fā)揮諸如CMOS檢測器這樣的大靶面?zhèn)鞲衅鞯男阅堋?/p>
擴大的筒鏡
視場數(shù)為25的超大成像端口
| 用于大視場成像的物鏡
具有圖像平場性的物鏡確保了從一邊到另一邊的高質(zhì)量圖像。充分發(fā)揮OFN25物鏡的潛力,可以大大加速數(shù)據(jù)的采集過程。
| 用于高通量數(shù)據(jù)采集的相機
高靈敏度單色相機DS-Qi2和高速彩色相機DS-Ri2擁有36.0 x 23.9 mm 尺寸、1625萬像素的CMOS傳感器,能夠充分發(fā)揮Ti2 25mm大視野的性能。
針對顯微鏡優(yōu)化的D-SLR相機技術(shù)
DS-Qi2
DS-Ri2
| 的尼康光學(xué)器件
尼康的高精度CFI60無限遠光學(xué)器件專為各種復(fù)雜觀察方法而設(shè)計, 憑借的光學(xué)性能和堅實的可靠性受到研究人員的廣泛好評。
| 切趾相差
尼康的切趾相差物鏡采用精選的振幅濾波器,能夠顯著增強反差并減少光暈假象, 從而提供精細的高清圖像。
切趾相位板集成在APC物鏡中
使用CFI S Plan Fluor ELWD ADM 40xC物鏡拍攝的BSC-1細胞
| 外部相差(Ti2-E)
電動外部相差系統(tǒng)通過避免使用相差物鏡,使用戶將相差與落射熒光成像相結(jié)合,同時不影響熒光的效率。例如,高數(shù)值孔徑(NA)的液浸物鏡可被用于相差成像。通過這個外部相差系統(tǒng),用戶可以輕易結(jié)合相差和其他的成像模式,包括弱熒光成像,例如TIRF 和光鑷。
落射熒光和外部相差圖像:
以GFP-alpha微管蛋白標記的PTK-1細胞,使用CFI Apo TIRF 100x Oil物鏡拍攝照片由Wadsworth Center博士科學(xué)研究員VI/教授Alexey Khodjakov提供
| DIC(微分干涉差)
尼康備受贊譽的DIC光學(xué)器件在各個放大倍數(shù)下都可以提供均勻、精細、高分辨率和對比度的圖像。DIC棱鏡是專門針對各個物鏡定制的, 能夠為每個標本提供品質(zhì)的DIC圖像。
物鏡轉(zhuǎn)盤中安裝與各個物鏡相匹配的DIC棱鏡
微分干涉差(DIC)和落射熒光圖像:
25mm視野大小的神經(jīng)元圖像(DAPI,Alexa Fluor 488,Rhodamine-Phalloidin);使用CFI Plan Apo lambda 60x物鏡和DS-Qi2相機拍攝照片由西北大學(xué)尼康成像中心Josh Rappoport提供;標本由西北大學(xué)S. Kemal、B. Wang和R. Vassar提供。
| NAMC(尼康高級調(diào)制反差)
這是一種兼容塑料板的高對比度成像技術(shù)。它適用于未被染色的透明樣品,比如卵母細胞。NAMC通過投影效果來提供仿三維圖像。用戶可針對每個標本輕松調(diào)節(jié)反差方向。
NAMC通過投影效果來提供仿三維圖像
尼康高級調(diào)制反差(NAMC)圖像:
小鼠胚胎,使用CFI S Plan Fluor ELWD NAMC 20x物鏡拍攝
| 自動校正環(huán)(Ti2-E)
標本厚度、蓋玻片厚度、標本折射率分布及溫度上的變化都可能導(dǎo)致球差和圖像扭曲。質(zhì)量的物鏡經(jīng)常配置調(diào)節(jié)環(huán)來補償這些變化。而校正環(huán)的準確調(diào)節(jié)是獲取高分辨率和高對比度圖像的關(guān)鍵。這款全新的自動校正環(huán)通過采用諧波驅(qū)動和自動校正算法,幫助用戶每次都能輕易地調(diào)到位置,進而發(fā)揮出物鏡的性能。
用于精確控制校正環(huán)調(diào)節(jié)的諧波驅(qū)動機制
超高分辨率圖像(DNA PAINT):
表達α微管蛋白(綠色)和TOMM-20(洋紅色)的CV-1細胞,使用CFI Apo TIRF 100x Oil物鏡拍攝。
| 落射熒光
λ系列物鏡采用了尼康獲得的納米水晶鍍膜技術(shù)(Nano Crystal Coat),使得它是高要求、弱信號、多通道熒光成像的理想選擇。因為這些應(yīng)用都要求系統(tǒng)在很寬的波長范圍內(nèi)保持高的傳輸效率和像差校準。新的熒光濾塊的熒光透過率更高,并且有諸如噪聲消除(Noise Terminator)這樣的雜散光消除技術(shù)。配合這樣的熒光濾塊,λ系列物鏡已經(jīng)證明其在弱熒光觀察領(lǐng)域的能力,包括單分子成像和基于冷光的應(yīng)用。
用于精確控制校正環(huán)調(diào)節(jié)的諧波驅(qū)動機制
冷光圖像:
表達基于BRET的鈣指示劑蛋白、納米鈣籠的Hela細胞。
標本由日本大阪大學(xué)科學(xué)與工業(yè)研究所的Takeharu Nagai博士提供
| 對焦
即使是溫度的最輕微變化和成像環(huán)境的最輕微振動, 也可能大大影響焦面穩(wěn)定性。Ti2采用靜態(tài)和動態(tài)措施消除焦面偏移,從而在長時實驗中能夠真實呈現(xiàn)納觀和微觀景象。
| 機械再設(shè)計, 實現(xiàn)超高穩(wěn)定性(Ti2-E)
為提高對焦穩(wěn)定性,電動Z軸和對焦系統(tǒng)(PFS)的自動調(diào)焦結(jié)構(gòu)經(jīng)過的重新設(shè)計。全新的Z軸調(diào)焦結(jié)構(gòu)尺寸更小,并且緊鄰物鏡轉(zhuǎn)盤,以地減少振動。即使在擴展(雙層光路)配置中,它也緊鄰物鏡轉(zhuǎn)盤,確保在所有應(yīng)用中均具有出色的穩(wěn)定性。
即使在擴展配置中,具有高穩(wěn)定性的Z軸調(diào)焦結(jié)構(gòu)也緊鄰物鏡轉(zhuǎn)盤
對焦系統(tǒng)(PFS)的檢測器部分已經(jīng)從物鏡轉(zhuǎn)盤分離,以減少物鏡轉(zhuǎn)盤上的機械負載。這種全新的設(shè)計還能減少熱傳遞,有助于創(chuàng)造更加穩(wěn)定的成像環(huán)境。因此,電動Z 軸電機的耗電量也有所降低。這些機械上的重新設(shè)計賦予成像平臺的穩(wěn)定性,使其非常適合單分子成像和超高分辨率應(yīng)用。
| 采用PFS 的新一代自動調(diào)焦結(jié)構(gòu):堪稱(Ti2-E)
一代的對焦系統(tǒng)(PFS)能夠自動修正溫度變化和機械振動帶來的焦點漂移(往往向標本添加試劑和多點成像時會引入此類干擾)。
PFS 實時檢測并跟蹤參考面的位置(例如使用浸液物鏡時的蓋玻片表面),從而保持焦面。的光學(xué)補償技術(shù)允許用戶在參考面的任意相對位置保持焦面。用戶可以直接對焦所需平面,然后啟用PFS。PFS通過內(nèi)置線性編碼器和高速反饋機制自動工作,并保持焦面,即使在長時、復(fù)雜的成像任務(wù)中亦能提供高度可靠的圖像。
PFS兼容各種應(yīng)用,從塑料培養(yǎng)皿的常規(guī)實驗到單分子成像和多光子成像均可適用。它還兼容各種波長,從紫外線到紅外線,這意味著它能夠用于多光子和光鑷應(yīng)用。
| 輔助向?qū)?/strong>
不再需要記住復(fù)雜的顯微鏡校準和操作步驟。Ti2可以整合來自傳感器的數(shù)據(jù),引導(dǎo)您完成這些步驟,避免人為操作失誤, 使研究人員能夠?qū)⒕械綌?shù)據(jù)上。
| 持續(xù)顯示顯微鏡狀態(tài)(Ti2-E/A)
一系列內(nèi)置傳感器檢測并傳遞顯微鏡各個組件的工作狀態(tài)信息。當您使用計算機獲取圖像時,所有狀態(tài)信息將記錄在元數(shù)據(jù)中,確保您能夠輕松調(diào)出采集條件和/或檢查設(shè)置錯誤。 此外,內(nèi)置相機允許用戶查看后焦平面,便于校準相差環(huán)和DIC的消光十字。它還為TIRF等應(yīng)用提供了一種安全的激光器校準方法。
內(nèi)置傳感器檢測顯微鏡組件的狀態(tài)
顯微鏡狀態(tài)既可以通過平板查看, 也可以通過顯微鏡前面板的狀態(tài)指示燈查看。這使得暗室中的狀態(tài)檢查也成為可能。
狀態(tài)指示燈
| 操作步驟向?qū)В═i2-E/A)
Ti2的輔助向?qū)Чδ転轱@微鏡操作提供互動式逐步引導(dǎo)。該功能可在平板或電腦上查看,并且融合了來自內(nèi)置傳感器和內(nèi)部相機的實時數(shù)據(jù)。輔助向?qū)Э梢詭椭脩敉瓿蓪嶒炘O(shè)置和故障排除。
| 自動檢測錯誤(Ti2-E/A)
通過檢查模式(Check Mode),用戶可以在平板或電腦上輕松確認所選觀察方法的所有相應(yīng)的顯微鏡組件是否到位。當所選觀察方式未能實現(xiàn)時,這種檢查模式可以減少排除故障所需要的時間和精力。該功能對多用戶使用的環(huán)境尤其有用,因為每位用戶都可能改變顯微鏡設(shè)置。用戶也可以預(yù)先編程自定義檢查程序。
顯示設(shè)置錯誤的組件
| 直觀的操作
Ti2經(jīng)過的重新設(shè)計——從總體機身結(jié)構(gòu)到每個按鈕和切換的選擇與布局都煥然一新——帶來了的用戶體驗。這些控件即使在暗室也能被輕松使用(大多數(shù)實驗都是在暗室中進行)。Ti2提供一個直觀和輕松的用戶界面, 確保研究人員能夠?qū)W⒂跀?shù)據(jù)而不是顯微鏡操作和控制。
| 針對顯微鏡控制精心設(shè)計的布局(Ti2-E/A)
所有按鈕和切換的布局均以其控制的照明類型為基礎(chǔ)。用于控制透射觀察的按鈕位于顯微鏡的左側(cè),而用于控制落射熒光觀察的按鈕位于右側(cè)。用于控制常規(guī)操作的按鈕在前面板上。這種分區(qū)方式便于記憶, 在暗室內(nèi)操作顯微鏡時尤其實用。
?往復(fù)式切換(Ti2-E)
顯微鏡設(shè)計中集成了往復(fù)式切換,用以控制熒光濾塊轉(zhuǎn)盤和物鏡轉(zhuǎn)盤等裝置。這些切換動轉(zhuǎn)動上述裝置的感覺,實現(xiàn)直觀控制。這些往復(fù)式切換中還可融合其他功能,確保單個切換可以操作多個相關(guān)裝置。例如,熒光濾塊轉(zhuǎn)盤的往復(fù)式切換不僅可以轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)盤,而且在用戶按壓切換時還可以開關(guān)熒光光閘。此外,還可以對這些切換編程,以操作發(fā)射濾片轉(zhuǎn)盤和外部相差單元。
?可編程的功能按鈕(Ti2-E/A)
快捷鍵的設(shè)計能夠方便用戶對功能進行自定義設(shè)置。用戶可以從超過100個功能中做出選擇,包括對快門等電動裝置的控制,甚至是通過用于觸發(fā)式采集的I/O端口至外部設(shè)備的單一輸出。還可以為這些按鈕模式功能,這樣就可以通過保存各個電動裝置隨時切換觀察方式。
?調(diào)焦旋鈕(Ti2-E)
調(diào)焦加速按鈕和對焦系統(tǒng)(PFS)啟用按鈕在調(diào)焦旋鈕旁邊。根據(jù)不同的形狀,可以非常容易地通過觸摸識別不同功能的按鍵。調(diào)焦速度根據(jù)當前使用的物鏡自動調(diào)節(jié)。這使得用戶可以在不同物鏡下得到各自理想的調(diào)焦速度,使得顯微鏡操作非常輕松。
| 使用控制桿和平板進行直觀控制(Ti2-E)
Ti2控制桿不僅能夠控制載物臺移動,而且能夠控制顯微鏡的大多數(shù)電動功能,包括對焦系統(tǒng)(PFS)的激活狀態(tài)。它可以顯示XYZ坐標和顯微鏡組件的狀態(tài),極大的方便用戶進行遠程操控。用戶也可以從通過無線局域網(wǎng)與顯微鏡相連的平板控制Ti2的電動功能,實現(xiàn)對顯微鏡的可視化操作體驗。