A549 人肺癌 細胞專用培養(yǎng)基
產(chǎn)品簡介：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
A549 人肺癌 細胞專用培養(yǎng)基 | 125ML、500ML | BJ-X021 |
A549 [A-549]細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持A549 [A-549]細胞生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含A549 [A-549]細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于A549 [A-549]細胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進一步科研使用，不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。
產(chǎn)品形態(tài) | 液體 |
產(chǎn)品濃度 | 1× |
產(chǎn)品規(guī)格 | 125mL×4 |
培養(yǎng)基成分 | Ham's F-12K＋10% FBS＋1% P/S |
細菌檢測 | 陰性 |
真菌檢測 | 陰性 |
支原體檢測 | 陰性 |
細胞生長實驗 | 細胞生長良好，形態(tài)正常 |
內毒素含量(EU/mL) | ≤3 |
儲存條件 | 2℃-8℃，避光儲存 |
運輸條件 | 冰袋冷藏運輸 |
有效期 | 3個月 |
細胞培養(yǎng)具體步驟：
一、常用設備
1. 準備室的設備
單蒸餾水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、高壓鍋、儲品柜（放置未消毒物品）、儲品柜（放置消毒過的物品）、包裝臺。配液室的設備：扭力天平和電子天平（稱量藥品）、PH計（測量培養(yǎng)用液PH值）、磁力攪拌器（配置溶液室攪拌溶液）。
2. 培養(yǎng)室的設備
液氮罐、儲品柜（存放雜物）、日光燈和紫外燈、空氣凈化器系統(tǒng)、低溫冰箱（-80℃）、空調、二氧化碳缸瓶、邊臺（書寫實驗記錄）。
3. 必須放在無菌間的設備
離心機（收集細胞）、超凈工作臺、倒置顯微鏡、CO2孵箱（孵育培養(yǎng)物）、水浴鍋、三氧消毒殺菌機、4℃冰箱（放置serum和培養(yǎng)用液）。
二、無菌操作
（一）無菌室的滅菌
1.定期打掃無菌室：每周打掃一次，先用自來水拖地、擦桌子、超凈工作臺等，然后用3‰來蘇爾或新潔爾滅或0.5％過氧乙酸擦拭。
2.CO2孵箱（培養(yǎng)箱）滅菌：先用3‰新潔爾滅擦拭，然后用75％酒精擦拭或者0.5％過氧乙酸，再用紫外燈照射。
3.實驗前滅菌：打開紫外燈、三氧殺菌機、空氣凈化器系統(tǒng)各20-30分鐘。
4.實驗后滅菌：用75％酒精（3‰新潔爾滅）擦拭超凈臺、邊臺、倒置顯微鏡的載物臺。
細胞培養(yǎng)方法：
01 原代培養(yǎng)操作步驟
原代培養(yǎng)的操作步驟為：取材→分離→培養(yǎng)。
（1）取材：對于不同的組織有不同的取材方法，但均應保持材料的新鮮及嚴格無菌。
細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：
（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。
（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。
（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。
（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。
（5）吸出所有細胞懸液至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。
（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。
（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人乳腺癌細胞 | 細胞角蛋白17(CK17)ELISA試劑盒 |
人腎透明細胞腺癌細胞-紅色+熒光標記 | 人S100鈣結合蛋白A8/A9復合物(S100A8/A9)ELISA試劑盒 |
人乳腺癌細胞-紅色標記 | 細胞毒相關蛋白A(CagA)ELISA試劑盒 |
人食管癌細胞 | 細胞毒(CTX)ELISA試劑盒 |
β-tc-6小鼠胰島瘤胰島β細胞 | 微管多特異性有機陰離子轉運蛋白2(ABCC3)ELISA試劑盒 |
小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞與大鼠膠質瘤細胞之融合細胞 | 髓磷脂P2蛋白(PMP2)ELISA試劑盒 |
人正常皮膚細胞 | 系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)ELISA試劑盒 |
人口腔表皮樣癌細胞 | 硒結合蛋白1(SELENBP1)ELISA試劑盒 |
Cas9穩(wěn)定表達的人肝癌細胞；PLC/PRF/5-Cas9-710 | 豬促胃液受體(GsaR)ELISA Kit |
腮腺囊癌細胞 | 戊型肝炎病毒抗體(IgG)ELISA試劑盒 |
SV－40轉化肺成纖維細胞 | 戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)ELISA試劑盒 |
人多發(fā)性骨髓瘤白血病細胞 | A549 人肺癌 細胞專用培養(yǎng)基戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)ELISA試劑盒 |
小細胞肺癌細胞 | 胎兒纖連蛋白(fFN)ELISA試劑盒 |
急性淋巴細胞 | 腎上腺髓質前體(Pro-ADM)ELISA試劑盒 |
胸膜積液B淋巴細胞 | 絲裂原活化蛋白激激6(MKK6)ELISA試劑盒 |
注意事項：
（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。
（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。
（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。
（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不，收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。
（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打對細胞損傷小，可以提高細胞活率。
（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產(chǎn)生）。
