22RV1人前列腺癌細胞專用培養(yǎng)基
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
22RV1人前列腺癌細胞專用培養(yǎng)基 | 125ML、500ML | BJ-X004 |
22RV1細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持22RV1細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含22RV1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于22RV1細胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。
產(chǎn)品形態(tài) | 液體 |
產(chǎn)品濃度 | 1× |
產(chǎn)品規(guī)格 | 125mL×4 |
培養(yǎng)基成分 | RPMI-1640+10% FBS+1% P/S |
細菌檢測 | 陰性 |
真菌檢測 | 陰性 |
支原體檢測 | 陰性 |
細胞生長實驗 | 細胞生長良好,形態(tài)正常 |
內(nèi)毒素含量(EU/mL) | ≤3 |
儲存條件 | 2℃-8℃,避光儲存 |
運輸條件 | 冰袋冷藏運輸 |
有效期 | 3個月 |
細胞培養(yǎng)具體步驟:
一、常用設(shè)備
1. 準備室的設(shè)備
單蒸餾水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、高壓鍋、儲品柜(放置未消毒物品)、儲品柜(放置消毒過的物品)、包裝臺。配液室的設(shè)備:扭力天平和電子天平(稱量藥品)、PH計(測量培養(yǎng)用液PH值)、磁力攪拌器(配置溶液室攪拌溶液)。
2. 培養(yǎng)室的設(shè)備
液氮罐、儲品柜(存放雜物)、日光燈和紫外燈、空氣凈化器系統(tǒng)、低溫冰箱(-80℃)、空調(diào)、二氧化碳缸瓶、邊臺(書寫實驗記錄)。
3. 必須放在無菌間的設(shè)備
離心機(收集細胞)、超凈工作臺、倒置顯微鏡、CO2孵箱(孵育培養(yǎng)物)、水浴鍋、三氧消毒殺菌機、4℃冰箱(放置serum和培養(yǎng)用液)。
二、無菌操作
(一)無菌室的滅菌
1.定期打掃無菌室:每周打掃一次,先用自來水拖地、擦桌子、超凈工作臺等,然后用3‰來蘇爾或新潔爾滅或0.5%過氧乙酸擦拭。
2.CO2孵箱(培養(yǎng)箱)滅菌:先用3‰新潔爾滅擦拭,然后用75%酒精擦拭或者0.5%過氧乙酸,再用紫外燈照射。
3.實驗前滅菌:打開紫外燈、三氧殺菌機、空氣凈化器系統(tǒng)各20-30分鐘。
4.實驗后滅菌:用75%酒精(3‰新潔爾滅)擦拭超凈臺、邊臺、倒置顯微鏡的載物臺。
細胞培養(yǎng)方法:
01 原代培養(yǎng)操作步驟
原代培養(yǎng)的操作步驟為:取材→分離→培養(yǎng)。
(1)取材:對于不同的組織有不同的取材方法,但均應(yīng)保持材料的新鮮及嚴格無菌。
細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下:
(1)傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度,當(dāng)細胞生長密度達到80%~90%時,即可進行傳代。
(2)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次,左右輕輕搖晃后棄掉。
(3)根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的,一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。
(4)把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化,2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時,再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落,然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化,使用吸頭輕輕吹打,混合均勻,以防消化過度。
(5)吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)棄上清,加入適量培養(yǎng)液重懸細胞,輕輕吹打混勻,使細胞均勻分散。
(7)用吸頭吸取適量細胞懸液,以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中,補足培養(yǎng)液,搖勻,放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間,甚至進行細胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人正常氣道上皮細胞 | 腫瘤關(guān)聯(lián)鈣信號轉(zhuǎn)導(dǎo)因子2(TACSTD2)ELISA試劑盒 |
人胚腎細胞GFP熒光穩(wěn)轉(zhuǎn)株 | AP-5復(fù)合物β亞基(PP1030)ELISA試劑盒 |
大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞 | 中性粒細胞明膠相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(Lipocalin-2/NGAL)ELISA試劑盒 |
小鼠腦神經(jīng)瘤細胞RFP熒光穩(wěn)轉(zhuǎn)株 | 中性粒細胞顆粒抗體(ANGA)ELISA試劑盒 |
人結(jié)直腸癌細胞RFP熒光穩(wěn)轉(zhuǎn)株 | 人前列腺性磷(PAP)ELISA試劑盒 |
小鼠胚胎成纖維細胞 | 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白G(hnRNP G)ELISA試劑盒 |
人結(jié)腸癌細 | 中性粒細胞防御3(DEFA3)ELISA試劑盒 |
小鼠肌腱前體細胞 | 中性粒細胞防御1-3(HNP1-3)ELISA試劑盒 |
A3人T淋巴細胞白血病細胞 | 轉(zhuǎn)錄激活因子4(ATF4)ELISA試劑盒 |
人胃腺癌細胞 | 中心體蛋白350kDa(CEP350)ELISA試劑盒 |
高轉(zhuǎn)移人肝癌細胞 | 中華肝吸蟲(CS)抗體(IgG)ELISA試劑盒 |
5-8轉(zhuǎn)基因鼻咽癌細胞系 | 22RV1人前列腺癌細胞專用培養(yǎng)基制瘤M受體(OSMR)ELISA試劑盒 |
小鼠肺成纖維細胞(永生化) | 人抗腎上腺皮質(zhì)抗體(AAA)檢測試劑盒elisa |
人飼養(yǎng)層上皮細胞 | 主要穹窿蛋白(MVP)ELISA試劑盒 |
人非小細胞肺癌細胞耐細胞 | 異質(zhì)核糖核蛋白Q(SYNCRIP/HNRPQ/NSAP1)ELISA試劑盒 |
注意事項:
(1)嚴格進行無菌操作,所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌,且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上,以免細胞發(fā)生污染。
(2)所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞,對培養(yǎng)液的要求不一樣,必要時可用預(yù)實驗的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。
(3)胎牛血清對于維持細胞生存,促進細胞生長起著關(guān)鍵作用??筛鶕?jù)文獻或預(yù)實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定,就應(yīng)保持用至實驗完成。
(4)消化細胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不,收集到的細胞數(shù)量少,或消化時間過長導(dǎo)致細胞成團塊樣絮狀游離,這時的細胞已有損傷或死亡,影響細胞數(shù)量和實驗進度。
(5)細胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠,或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后,應(yīng)先彈散細胞沉淀,再加入培養(yǎng)液重懸,這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小,可以提高細胞活率。
(6)吹打細胞時應(yīng)盡量避免細胞的產(chǎn)生,以免損傷細胞,影響細胞狀態(tài)(吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生)。