Calcein Blue, AM 鈣黃綠素藍（藍色）
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產(chǎn)品關(guān)鍵詞：
Calcein Blue, AM 鈣黃綠素藍；Calcein, AM 鈣黃綠素；Calcein Red鈣黃綠素紅；DAPI；活細胞染色探針； CAS NO：168482-84-6；
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
Calcein Blue, AM 鈣黃綠素藍（藍色） | MX3015-1MG | 1mg | 1315 |
【溫馨提示】：見我司懋康生物（maokangbio）整理的Calcein 鈣黃綠素（常用的活細胞熒光探針）專題。
產(chǎn)品描述
Calcein, AM，中文名鈣黃綠素乙酰甲酯，CAS NO：148504-34-1，一種具細胞膜滲透性zui受huan迎的活細胞熒光染料，用來標(biāo)記和監(jiān)測活細胞功能，呈綠色熒光（Ex/Em= 490nm/515nm）。然而，Calcein, AM單一顏色使其不能將其用在多重標(biāo)記實驗，比如，其無法和GFP轉(zhuǎn)染細胞聯(lián)合使用，因光譜一致。為了解決這一應(yīng)用缺陷，我司特別開發(fā)出Calcein Blue, AM、Calcein Red, AM等，實現(xiàn)聯(lián)合Calcein, AM對活細胞的多重標(biāo)記和功能分析。
Calcein Blue, AM本身僅呈微弱熒光（Ex/Em~322/435nm），具有細胞膜滲透性。一旦進入細胞后，被細胞內(nèi)酯酶水解為鈣黃綠素藍（Calcein Blue），探針極性增強并能保留在細胞內(nèi)數(shù)小時，此時熒光強度增強且熒光光譜遷移到更長波長（Ex/Em~360/445nm），光譜特征類似于DAPI、Hoechst 33342或Hoechst 33258。
產(chǎn)品特性
1） CAS NO：168482-84-6
2） 化學(xué)名：N-[2-[(acetyloxy)methoxy]-2-oxoethyl]-N-[(7-hydroxy-4-methyl-2-oxo-2H-1-benzopyran-8-yl) methyl]-glycine, (acetyloxy)methyl ester
3） 同義名：Calcein Blue Acetoxymethyl ester鈣黃綠素藍乙酰氧基甲酯；
4） 分子式：C21H23NO11
5） 分子量：465.41
6） 純度：≥90%
7） Ex/Em：360/445nm
8） 溶解性：溶于DMSO（1~5mM）
9） 化學(xué)結(jié)構(gòu)式： 
保存與運輸方法
保存：-20℃避光干燥保存，至少一年有效。
運輸：冰袋運輸。
注意事項
1） 熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。
2） 乙酰氧基甲基酯（AM）易吸潮，冰箱取出后請在干燥的環(huán)境放至室溫后再開封。由于試劑微量，開封前請將其短暫離心，以保證粉末落入管底。
3） Calcein Blue, AM對濕度非常敏感，粉末保存一定要保持干燥。Calcein Blue, AM儲存液需要分裝避光凍存，且必須緊緊密封蓋子，干燥保存。Calcein Blue, AM工作液必須現(xiàn)配現(xiàn)用。
4） 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
A， 儲存液制備
儲存液配制范圍可為1～5 mM，具體根據(jù)工作濃度來決定，建議提前配制成1000×儲存液。若使用的工作液為5μM，那么可配制5mM的儲存液，即往1mg Calcein Blue, AM（Mw：465.41）內(nèi)加入430μl 細胞培養(yǎng)級別的DMSO（貨號：MS4601A-100ML），充分溶解，混勻。儲存液根據(jù)單次用量分裝-20℃保存，避免反復(fù)凍融，數(shù)月穩(wěn)定（不要超過6個月）。
B， 20% Pluronic F-127制備【可選】
稱取100mg Pluronic F-127粉末（貨號：MS4301-100MG）中加入500μl DMSO，配制成20%(w/v) DMSO母液。溶解過程需要在40-50℃加熱20-30min。溶液室溫保存，不用冷藏。如有結(jié)晶析出，可以重新加熱后溶解，不影響使用。
C， 染色步驟
大多數(shù)實驗體系中Calcein Blue, AM的工作濃度為2-5μM。由于不同細胞系的染色條件不同，初次實驗建議做梯度實驗，以確定Calcein Blue, AM的工作濃度，以zui低的探針濃度得到zuihao的熒光結(jié)果為篩選原則。
1） 取一管適量分裝的儲存液（1000×）置于室溫，至少回溫20min，低速離心后，用合適的緩沖液如PBS，HBSS-HEPES稀釋到1×染色工作液。
【注意】：有時可添加一定量的非離子表面活性劑如Pluronic F127到Calcein Blue, AM儲存液內(nèi)來增強其水溶性。制備染色工作液前，取一管Calcein Blue, AM儲存液內(nèi)加入等體積的20% Pluronic F127，使Pluronic F127的終濃度為0.02%。加入Pluronic F127的Calcein Blue, AM溶液不可長期保存，需現(xiàn)配現(xiàn)用。
2） 對于貼壁細胞，先用yi酶-EDTA或Accutase消化細胞，離心收集細胞（1000 rpm，3min）。對于懸浮細胞，直接離心收集細胞?！咀⒁狻浚嘿N壁細胞也可進行原位染色。
3） 去上清，用PBS（或者其他緩沖液）清洗細胞2~3次，以充分去除殘留的酯酶活性。
4） 用1/10細胞培養(yǎng)基體積的Calcein Blue, AM染色工作液重懸細胞，37℃孵育20min～1h。
【注意】：1）若細胞自身含有機陰離子轉(zhuǎn)運體，需加入丙huang舒（1-2.5mM）或者苯磺唑酮（0.1-0.25mM）到孵育體系內(nèi)以降低去酯化的Calcein Blue泄露到胞外；2）降低探針加載溫度，可能會減少探針區(qū)室化現(xiàn)象。
5） 用PBS（或者其他緩沖液）洗滌細胞兩次去除多余染料。
【注意】：如有必要，使用含有機陰離子轉(zhuǎn)運抑制劑的緩沖液來進行細胞清洗。
6） 用含合適濾光片（Ex/Em=360/445nm）的儀器進行檢測。
相關(guān)產(chǎn)品
貨號 | 名稱 | 規(guī)格 | Ex/Em |
MX3011-50UG | Calcein AM, Ultra Pure Grade 鈣黃綠素（綠色） | 50μg | 490/515nm |
MX3013-1MG | Calcein Red, AM 鈣黃綠素紅（紅色） | 1mg | 560/574nm |
MX3014-1MG | Calcein Deep Red Acetate 鈣黃綠素深紅醋酸鹽 | 1mg | 646/659nm |
MX3015-1MG | Calcein Blue, AM 鈣黃綠素藍（藍色） | 1mg | 360/445nm |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務(wù)工作，主要從事細胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經(jīng)營理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
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