SRSV/3T3SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細(xì)胞上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清，ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級(jí)胎牛血清，優(yōu)等胎牛血清，標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清，gibco特優(yōu)級(jí)胎牛血清血清，新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體（FITC標(biāo)記抗體）SRSV/3T3SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細(xì)胞：
（1） 收集1×106個(gè)細(xì)胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞，800rpm離心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體（5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測(cè)即可。
（4） 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法：
（1）收集2×106個(gè)細(xì)胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細(xì)胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標(biāo)記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
（5）加入熒光標(biāo)記（FITC）標(biāo)記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞；固定待測(cè)。
（7）流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時(shí)。
（3）調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升，取1毫升細(xì)胞懸液，用PBS洗三次，細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品：
Propionic anhydride 丙酸酐 123-62-6
purity 96-98%  61177-44-4
p-Xylene 對(duì)二甲苯 106-42-3
Pyocyanin 綠膿素 85-66-5
PYRAZIN-2-YL-HYDRAZINE 吡嗪-2-肼 54608-52-5
Pyrazine, 2,6-diethynyl- （9CI）  680-98-8
Pyrazine,2-Methoxy-5-Methyl- 2-甲氧基-5-甲基吡嗪 2882-22-6
Pyrazinecarbonitrile, 3-aMino-6-propyl-, 4-oxide （9CI）  50627-14-0
Pyrazino[2,3-f]quinoxaline 吡嗪-喹啉 231-23-2
Pyrazolo[1,5-a]-1,3,5-triazine-2,4（1H,3H）-dione 吡唑并[1,5-A]-1,3,5-三嗪-2,4（1H,3H）-二酮 34683-40-4
Pyrazolo[1,5-a]pyridine 吡唑并[1,5-a]吡啶 274-56-6
Pyridazine-4-boronic acid pinacol ester 噠嗪-4-硼酸頻那醇酯 863422-41-7
Pyridine, 2-（4-broMo-1H-iMidazol-2-yl）-  71048-48-1
PYRIDINE, 2,6-DIFLUORO-4-IODO-  685517-71-9
Pyridine, 2-chloro-4-（chloroMethyl）- （9CI） 2-氯-4-（氯甲基）吡啶 101990-73-2
Pyridine, 2-chloro-4,5-diMethyl- （9CI）  343268-69-9
Pyridine,2-fluoro-4-iodo-6-Methyl- 2-氟-6-甲基-4-碘吡啶 884494-45-5
Pyridine,2-Methyl-3-[（5-nitro-2-pyridinyl）oxy]-  200940-26-7
PYRIDINE-2-SULFONYL CHLORIDE 吡啶-2-磺酰氯 66715-65-9
Pyridine-3-boronic acid 吡啶-3-硼酸 1692-25-7
Pyridine-3-sulfonaMide 吡啶-3-磺酰胺 2922-45-4
PYRIDINE-3-SULPHONIC ACID 3-吡啶磺酸 636-73-7
細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來(lái)，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時(shí)后．再放入－８０度冰箱過(guò)夜，第二天放入液氮罐保存
原則　　慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過(guò)1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過(guò)夜。第二天放入液氮中。