Peprotech品牌貨號(hào):400-23進(jìn)口原裝Rat GM-CSF細(xì)胞因子北京現(xiàn)貨

重組細(xì)胞因子要求：

1. 真實(shí)性：重組蛋白產(chǎn)品*經(jīng)過(guò)N末端氨基酸序列分析；必要時(shí)應(yīng)用SDS-PAGE, RP-HPLC和質(zhì)譜(MS)檢測(cè)其真實(shí)性。

2. 純度：應(yīng)用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析產(chǎn)品純度。

3. 生物活性：進(jìn)行相應(yīng)的體外(in vitro)或體內(nèi)(in vivo)活性檢測(cè)。

4. 蛋白含量：通過(guò)紫外光譜分析，SDS-PAGE電泳檢測(cè)；必要時(shí)應(yīng)用HPLC定量標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液。

5. 內(nèi)毒素：kinetic LAL法檢測(cè)內(nèi)毒素。

6. 微生物：重組蛋白在裝瓶之前都經(jīng)過(guò)濾除菌處理。

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有不少用戶沒(méi)注意說(shuō)明書(shū)上的描述，而是根據(jù)習(xí)慣，直接用PBS或培養(yǎng)液(1640或DMEM等)等溶解細(xì)胞因子或蛋白的凍干粉。這樣做可以嗎？
答：有時(shí)可以，要看具體情況。PeproTech的大多數(shù)細(xì)胞因子或蛋白凍干粉的溶解液不是PBS，此時(shí)千萬(wàn)不能用PBS或培養(yǎng)液直接來(lái)溶解，具體原因在上面已經(jīng)敘述過(guò)。而有部分細(xì)胞因子，如重組人KGF(產(chǎn)品編號(hào)：100-19)和重組人FGF-23(產(chǎn)品編號(hào)：100-52)等，說(shuō)明書(shū)上的溶解液即為1x PBS，此時(shí)用PBS溶解*沒(méi)問(wèn)題，那么用培養(yǎng)液溶解也是可以的，不過(guò)還是用先用PBS溶解，然后再用培養(yǎng)液稀釋。

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一定要溶解到的濃度。
蛋白在一定的濃度范圍內(nèi)可以保持良好的穩(wěn)定性，這個(gè)范圍就是說(shuō)明書(shū)上所標(biāo)明的濃度范圍，該例為0.1-1.0 mg/ml。這個(gè)濃度范圍對(duì)于不同的細(xì)胞因子或重組蛋白是不同的。如重組人FGF-6(產(chǎn)品編號(hào)：100-30)為0.5-1.0mg/ml，而重組人Activin B(產(chǎn)品編號(hào)：120-15)則一定要是0.5mg/ml。

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高于或低于該濃度范圍會(huì)有什么問(wèn)題呢？
答：首先，細(xì)胞因子或蛋白會(huì)不穩(wěn)定，即很容易出現(xiàn)活性下降的現(xiàn)象。其次，高于這個(gè)濃度范圍，可能會(huì)超過(guò)該蛋白的zui大溶解濃度，即蛋白無(wú)法*溶解。再者，高于或低于該濃度范圍，蛋白可能會(huì)出現(xiàn)聚集(aggregation)，zui終結(jié)果還是部分蛋白未溶解，導(dǎo)致蛋白活性的減弱。一定不能振蕩(vortex)。這里所說(shuō)的振蕩是指用渦旋儀進(jìn)行快速振蕩。

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有用戶會(huì)問(wèn)，若想保證溶解液與凍干粉充分混勻，以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞因子或重組蛋白的*溶解，該怎么辦呢？
答：多數(shù)細(xì)胞因子或重組蛋白的凍干粉是非常容易溶解的，一般我們用移液槍的槍頭輕吹幾下，即可

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