人纖溶酶原(Plg) ELISA試劑盒

操作步驟：

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?/span>100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后立即進(jìn)行檢測。

人纖溶酶原(Plg) ELISA試劑盒

ELISA臨床意義
●各型肝炎的特征及標(biāo)志物
乙肝二對半的模式及臨床意義
HBsAg  HBeAg  HBcAb-IgG   HBcAg-IgM   HBeAb    HBsAb         臨床意義
 +　　　　+　　　　- 　　　　 -　　　　-　　　　-　　　　急性HBV感染早期HBV復(fù)制活躍
 +　　　　+　　　　+　　　　　+　　　　-　　　　-　　　　急慢性HBV感染，HBV復(fù)制活躍
 +　　　　-　　　　+　　　　　+　　　　-　　　　-　　　　急慢性HBV感染，HBV復(fù)制中躍
 +　　　　-　　　　+　　　　　+　　　　+　　　　-　　　　急慢性HBV感染，HBV復(fù)制低躍

 +　　　　-　　　　+　　　　　-　　　　+　　　　-　　　　HBV復(fù)制停止或極低
 -　　　　-　　　　+　　　　　+　　　　-　　　　-　　　　平靜的HBV攜帶狀態(tài)，HbsAg

 -　　　　-　　　　+　　　　　-　　　　-　　　　-　　　　HBV既往感染，未產(chǎn)生抗-HBs
 -　　　　-　　　　+　　　　　+　　　　+　　　　-　　　　抗HBs出現(xiàn)前期，HBV復(fù)制低
 -　　　　-　　　　+　　　　  -　　　　+　　　　+　　　　HBV感染恢復(fù)期
 -　　　　-　　　　+　　　　  -　　　　-　　　　+　　　　HBV感染恢復(fù)期
 +　　　　+　　　　+　　　　　+　　　　-　　　　+　　　　不同亞型ＨＢＶ再感染
 +　　　　-　　　　-　　  　　-　　　　-　　　　-　　　?。龋拢郑模危琳?/span>
 -　　　　-　　　　-　  　　　-　　　　-　　　?。　　〔『蠡蚪臃N疫苗后獲得免疫　


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