脂肪酸代謝系列_甘油三酯(TG)含量測(cè)試盒
測(cè)定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣
注 意 :正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
TG是長(zhǎng)鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不僅是細(xì)胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。
脂肪酸代謝系列_甘油三酯(TG)含量測(cè)試盒
測(cè)定原理:
用異丙醇提取TG,脂蛋白酯酶水解TG生成甘油和脂肪酸(FFA),甘油與三磷酸腺苷在甘油激酶和磷酸甘油氧化酶催化下生成H2O2,過氧化物酶催化過氧化氫氧化4-氨基偶聯(lián)酚,生成有色化合物,在505 nm處有特征吸收峰。
自備儀器和用品:
酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、96孔板、研缽、冰和蒸餾水
試劑組成和配置:
試劑一:液體120 mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體12 mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體12 mL×1瓶,4℃避光保存。
TG的提取:
1、 組織中TG的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,8000g,4℃離心10min,取上清,即TG待測(cè)液。
2、細(xì)胞、細(xì)菌中TG的提?。合仁占?00-500萬細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),離心后棄上清,加1mL試劑一,超聲波破碎1min(強(qiáng)度20%,超聲2s,停1s),8000g,4℃離心10min,取上清,即TG待測(cè)液。
3、血清(漿)樣品:直接測(cè)定。