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上海酶聯(lián)生物研究所

上海酶聯(lián):應(yīng)該如何進(jìn)步ELISA的重現(xiàn)性?

時(shí)間:2020-3-27閱讀:228
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免疫檢測(cè)法的性表現(xiàn)為單次試驗(yàn)孔間(批內(nèi))的重復(fù)性和屢次試驗(yàn)之間(批間)的重復(fù)性。CV值高則表明度低,一般由以下兩個(gè)原因形成:移液技能和洗刷技能。 

一:移液技能 

1. 移液時(shí),槍頭應(yīng)對(duì)準(zhǔn)孔*,防止接觸孔壁及底部。
2. 移液后悄悄晃動(dòng)混勻試劑。 

3. 假如您的樣品具有黏性,請(qǐng)預(yù)先潤(rùn)洗槍頭以消除表面張力的影響。吸液時(shí)等候片刻使體積平衡后再取出。 

4. 移液不充分或移液體積不均,闡明移液器需求校對(duì)。必要時(shí)請(qǐng)查看移液器并重新校對(duì)。 

5. 加樣時(shí),不同的試劑標(biāo)準(zhǔn)品和樣本間都要保證更換槍頭,防止穿插污染。 

6. 保證運(yùn)用合適的槍頭。不合適的槍頭無(wú)法正確量取吸液和加樣的體積。 

二:洗刷技能 

1. 假如運(yùn)用自動(dòng)洗板機(jī)或多通道移液器,請(qǐng)保證進(jìn)出口能正常運(yùn)作。 

2. zui后一次洗刷后,翻轉(zhuǎn)酶標(biāo)板倒出剩余的洗刷液,并在吸水紙上拍干液體。洗板太快或太慢都會(huì)降低度。不能讓孔內(nèi)液體天然風(fēng)干,需當(dāng)即進(jìn)行下一步操作。 

3. 依照闡明書,增加足量的洗刷液至孔內(nèi),并保證洗刷*。 

4. 因?yàn)橄此⒁翰皇峭ㄓ玫?,?dāng)試劑盒內(nèi)的洗刷液用完時(shí),請(qǐng)不要運(yùn)用其他試劑盒中的洗刷液。如有需求,可聯(lián)絡(luò)技能支持尋求幫助。 

5. 不要減少洗刷時(shí)的浸泡時(shí)間或跳過(guò)浸泡的步驟。 

6. 依照闡明書上引薦的洗刷次數(shù)清洗,隨意改動(dòng)洗刷次數(shù)會(huì)影響試驗(yàn)的準(zhǔn)確性。 

三:貯液瓶 

1. 為防止污染,不同的試劑運(yùn)用不同的貯液瓶。一些試劑或樣本很容易被污染(比如唾液、氧化劑等),請(qǐng)參閱闡明書操作。必要時(shí)候采取一些預(yù)防措施維護(hù)溶液。 

四:封板覆膜 

1. 運(yùn)用過(guò)的封板覆膜可能含有上一步試驗(yàn)殘留的試劑,假如重復(fù)運(yùn)用會(huì)形成孔板污染。建議每一次孵育運(yùn)用新的封板覆膜。 

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