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(CAP)酶聯(lián)免疫 (ELISA)

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(CAP)酶聯(lián)免疫    (ELISA)
試  盒使用說明書
本試
1  使用目的:
本試
飼料、魚、
(大閘蟹)和肉類組織(如雞、牛肉和豬肉),雞  、蜂
(CAP)殘留的定量檢測。
蜜、牛奶、血清和尿樣中
2  實(shí)驗(yàn)原理
本試
ELISA  方法,在微孔板包被有
(CAP)偶聯(lián)抗原,
素(CAP)標(biāo)準(zhǔn)品或樣品,游離
(CAP)與微孔條上預(yù)包被的
(CAP)偶聯(lián)抗
原互相競爭抗
(CAP)抗體酶標(biāo)記物,用 TMB底物顯色,
變?yōu)辄S色,用酶標(biāo)儀在  450nm  波長下進(jìn)行檢測,吸光值與樣品中
(CAP)的含量。
(CAP)含量成反
計(jì)算樣品中
3  試
3.1  預(yù)包被的
(CAP)偶聯(lián)抗原的可拆酶標(biāo)板:1塊(12孔×8條)。
(  CAP ) 標(biāo) 準(zhǔn) 品 : 6 瓶 ( 1ml/ 瓶 ), 含 量
3.2
:  0ng/ml,
0.025ng/ml,0.1ng/ml,0.25ng/ml,1ng/ml,4ng/ml
3.3抗
(CAP)抗體酶
:1瓶(6ml)。
3.4顯色液  A:1瓶(6ml)。
3.5顯色液  B:1瓶(6ml)。
3.6終止液:1瓶(6ml),2M硫酸。
3.7*:1瓶(10×,      6ml),用于樣品稀釋用。
3.8濃
:1瓶(20×,20ml),用于洗板。
3.9說明書一份。
4  需要而未提供的材料
4.1  設(shè)備
4.1.1波長450nm酶標(biāo)儀。
4.1.2粉碎機(jī)。
4.1.3量筒。
4.1.4振蕩器。
4.1.5漏斗。
4.1.6Whatman 或相當(dāng)?shù)臑V紙。
4.1.7微量移液器。
4.2  試
4.2.1去離子
4.2.2  甲醇。
5  貯存
5.1  試
2~8℃,
5.2  未用完的微孔板應(yīng)該密封干燥保存
6  注意事項(xiàng)
6.1  使用(25±2℃),建議至少回溫2小時(shí)。

6.4標(biāo)準(zhǔn)品中含有
(CAP),使用時(shí)應(yīng)特
,操作時(shí)應(yīng)帶手套。
6.5終止液中含有硫酸,使用時(shí)防止灼傷皮膚及腐
6.6不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不能混用,否
6.7不同批號(hào)試;不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不得混用,否
實(shí)驗(yàn)
6.8稀釋樣本時(shí)必須用本試
6.9混合試
7工作液準(zhǔn)備
7.1
(CAP)標(biāo)準(zhǔn)品溶液:0ng/ml, 0.025ng/ml,0.1ng/ml,0.25ng/ml,1ng/ml,4ng/ml7.2濃:用蒸餾
1:20(1+19)稀釋備用
1:10(1+9)稀釋備用
7.3*:用蒸餾
7.3 顯色:已備用,避免光線直照
7.4反應(yīng)終止液:已備用
8樣品處理程序(樣品在提取過程中,要嚴(yán)格按說明書操作,提取過程中應(yīng)準(zhǔn)確稀釋,否
會(huì)
,樣品應(yīng)當(dāng)保存在陰涼避光之處及冷藏保存)
8.1取10g粉碎的樣品,      20ml 70%甲醇溶液
8.2強(qiáng)            3
8.3用Whatman 濾紙過濾
8.4取25μl處理后的樣品,
25μl*于反應(yīng)孔中(樣本稀釋倍數(shù)為2)
9酶免
9.1實(shí)驗(yàn)須知
9.1.1實(shí)驗(yàn)開始
(25±2℃),時(shí)間約2小時(shí)?;販刂潦?br>溫(25±2℃)后再取
注:一定保證回溫充,否
9.1.2使用后請(qǐng)立即將試
9.1.3請(qǐng)不要改變
,多余的微孔條重新密封立即于2~8℃干燥保存
和準(zhǔn)確度。
2~8℃保存
9.1.4請(qǐng)使用的微量移液器
9.1.5操作一旦開始,請(qǐng)不要中斷任何程序
9.1.6 ELISA
,請(qǐng)嚴(yán)格按照要
9.1.7為避免交叉
9.1.8
,每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品均應(yīng)使用不同的吸頭
9.2
9.2.1預(yù)*行
,標(biāo)記B0、標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位,*進(jìn)行雙孔檢測
9.2.2取所需數(shù)量的微孔(微孔條可拆),將多余板條重新密封并立即放回2~8℃保存
9.2.3樣品稀釋液(10×)、濃  (20×)稀釋成工作液(蒸餾
50μl0.0 ng/ ml標(biāo)準(zhǔn)品溶液

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