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大鼠表皮組織提取物說(shuō)明書

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更新時(shí)間:2024-01-17 09:46:56瀏覽次數(shù):1312次

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大鼠表皮組織提取物說(shuō)明書

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大鼠表皮組織提取物【Skin: Normal Rat Epidermal Derivatives】
     大鼠表皮組織提取物說(shuō)明書表皮組織是由胚胎時(shí)期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用。公司科技提供來(lái)自新鮮或冷凍大鼠表皮組織中高質(zhì)量的總RNA,PCR準(zhǔn)備的*條cDNA鏈,蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備:利用Qiagen RNeasy KitTrizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。        cDNA制備:純化后的總RNA來(lái)合成cDNA*鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及0mgRNA68℃反應(yīng)0min 后終止RT反應(yīng)。利用x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA, μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。        蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人血管組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。        潛在的應(yīng)用: <>已知基因的PCR克??;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標(biāo)測(cè)序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測(cè)與蛋白質(zhì)組學(xué);<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。
培養(yǎng)步驟:
大鼠表皮組織提取物說(shuō)明書對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按:2到:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

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大鼠表皮組織提取物說(shuō)明書標(biāo)準(zhǔn)品   英文名稱Benzocaine   規(guī)格 :500mg  CAS:34584  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

甲酸標(biāo)準(zhǔn)品   英文名稱Benzoic Acid   規(guī)格 :300mg  CAS:65-85-0  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

苯佐那酯標(biāo)準(zhǔn)品   英文名稱Benzonatate   規(guī)格?。篻  CAS:04-3-4  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

苯并噻二嗪相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品   英文名稱   規(guī)格 :00mg  CAS:2-30-2  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

,4-苯醌標(biāo)準(zhǔn)品   英文名稱,4-Benzoquinone   規(guī)格?。?00mg  CAS:06-5-4  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

鹽酸芐非明標(biāo)準(zhǔn)品   英文名稱   規(guī)格?。?00mg  CAS:54-22-3  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

甲磺酰苯扎標(biāo)準(zhǔn)品   英文名稱Benztropine Mesylate   規(guī)格?。?00mg  CAS:32-7-2  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

甲醇標(biāo)準(zhǔn)品   英文名稱Benzyl Alcohol   規(guī)格 :500mg  CAS:00-5-6  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

甲酸芐酯標(biāo)準(zhǔn)品   英文名稱Benzyl Benzoate   規(guī)格 :5g  CAS:20-5-4  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

 

-芐基-3-甲基-5-氨基吡唑鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品

 

   英文名稱   規(guī)格 :25mg  CAS:  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

羥萘芐芬寧標(biāo)準(zhǔn)品   英文名稱Bephenium Hydroxynaphthoate   規(guī)格?。?00mg  CAS:388-50-6  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

標(biāo)準(zhǔn)品   英文名稱Berberine Chloride   規(guī)格?。?0mg  CAS:633-65-8  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

beta-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)品   英文名稱   規(guī)格 :ea  CAS:  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

注意事項(xiàng):
. 接收到大鼠表皮組織提取物說(shuō)明書,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞00X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。 

 

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