注意事項(xiàng)：

1. 本試劑盒的檢測試劑中含有螢光素酶，反復(fù)凍融會導(dǎo)致其逐漸失活。盡管經(jīng)測試本試劑反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，為取得良好的使用效果，*次解凍后可適當(dāng)分裝保存。反復(fù)凍融過程中，可能會導(dǎo)致檢測試劑中出現(xiàn)少量沉淀，此時宜平衡至室溫，并盡量溶解。如仍有殘留的不溶物，可以離心去除后使用，經(jīng)測試不會影響后續(xù)的檢測效果。

2. 檢測時需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板，相鄰孔之間會產(chǎn)生相互干擾。

3. 支原體檢測試劑盒細(xì)胞凋亡與增殖使用說明中提供了檢測ATP標(biāo)準(zhǔn)品的方法，實(shí)際檢測細(xì)胞活力時通常并不需要檢測ATP標(biāo)準(zhǔn)品。

操作步驟：

貼壁細(xì)胞：

1.被檢細(xì)胞接種于無菌的6孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，接種密度為1-2×104。同時，接種正常無支原體感染的同種細(xì)胞，作為陰性對照。

2.5天后，先吸去培養(yǎng)液，再加入1ml的固定液，靜置20min，

3.吸去固定液，晾干。

4.于每孔中，加入1ml的Hoechst33258工作液(Hoechst 33258工作液須覆蓋全部被檢細(xì)胞)，37℃避光放置15-20min或室溫靜置20～30min。

5.吸去Hoechst 33258工作液，加入2ml滅菌超純水洗滌三次，直接風(fēng)干。風(fēng)干后加入一滴封片液，并以蓋玻片覆蓋。

6.熒光顯微鏡觀察。用紫外激發(fā)光激發(fā)，觀察細(xì)胞周圍是否有藍(lán)色熒光小點(diǎn)或串珠狀熒光小點(diǎn)。

懸浮細(xì)胞：

1.收集需檢測的細(xì)胞，1500rpm，5min。

2.將收集的細(xì)胞涂片于載玻片上，再加1ml的固定液，靜置20min。

3.吸去固定液，晾干。

4.于每孔中，加入1ml的Hoechst33258工作液(Hoechst 33258工作液須覆蓋全部被檢細(xì)胞)，37℃避光放置15～20min或室溫靜置20～30min。

本試劑盒是利用熒光染料檢測支原體污染。這種染料會結(jié)合到DNA的A-T富集區(qū)域，因?yàn)橹гw的DNA中A-T含量高(55％～80％)，所以可將其染色而被檢測到。被支原體污染的細(xì)胞經(jīng)染色后在細(xì)胞周圍可看到許多大小均一的熒光小點(diǎn)，即為支原體的DNA染色斑，說明有支原體污染。Hoechst 33258的大激發(fā)波長為346nm，大發(fā)射波長為460nm;Hoechst 33258和雙鏈DNA結(jié)合后，大激發(fā)波長為352nm，大發(fā)射波長為461nm。

公司正在出售的產(chǎn)品：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

細(xì)胞生物學(xué)研究的常用技術(shù)有哪些：

1.顯微技術(shù)：包括顯微觀察,顯微操作.

2細(xì)胞組分分析技術(shù)：離心分離技術(shù),生物大分子定位技術(shù),定量細(xì)胞化學(xué)分析技術(shù).
3.細(xì)胞工程：細(xì)胞培養(yǎng)。