CCCP(50mM) 細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑

商品介紹：

本品是溶于DMSO的CCCP溶液，濃度為50mM，體積為100μl（相當(dāng)于1mg的總量），常用作一種陽性對照來誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并配合線粒體膜電位檢測探針JC-1（貨號SY0488）或者JC-10（貨號SY0490）來進(jìn)行相關(guān)研究。

商品屬性：

CCCP，即Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone，一種質(zhì)子載體（H+ ionophore），是一種強(qiáng)效的線粒體氧化磷酸化解偶聯(lián)劑，促使線粒體內(nèi)膜對H+產(chǎn)生通透性，導(dǎo)致線粒體內(nèi)膜兩側(cè)的膜電位喪失，誘導(dǎo)凋亡發(fā)生。也可作用于葉綠體膜，抑制光合作用；CCCP還可抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)-高爾基體（ER-Golgi）之間的蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)，高親和力結(jié)合細(xì)胞se素C氧化酶。

CCCP還具有其他功能：

1）在牛蛙交感神經(jīng)方面的實驗表明，CCCP 可增強(qiáng)促黃體生成素釋放激素的釋放；

2）作為一種質(zhì)子導(dǎo)體在葡萄糖存在的情況下影響E.coli 細(xì)胞活性；

3）對細(xì)胞內(nèi)鈣水平的各種調(diào)節(jié)效應(yīng)；

4）抑制脂肝酶的分泌；

5）部分抑制pH梯度活化的Cl-攝取以及刷狀緣膜的Cl-/Cl-交換等。

儲存條件：-20℃，有效期12個月

步驟和注意事項：?

準(zhǔn)備實驗環(huán)境：?確保實驗區(qū)域清潔，?使用酒精清潔計數(shù)板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?

細(xì)胞培養(yǎng)：?

準(zhǔn)備試管或培養(yǎng)皿、?細(xì)胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細(xì)胞。?

取出保存于低溫下的細(xì)胞苗，?并加入培養(yǎng)基中，?搖晃混合均勻。?

用移液管將細(xì)胞培養(yǎng)基和細(xì)胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?

將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中，?定期更換培養(yǎng)液。?

細(xì)胞凍存與復(fù)蘇：?

細(xì)胞系的凍存是將生長較好的傳代細(xì)胞懸浮在加有冷凍保護(hù)劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對其長期保存的過程。?

復(fù)蘇則是將凍存的細(xì)胞系恢復(fù)到常溫的過程，?原則是“慢凍快融"，?以較大限度地保存細(xì)胞活力。?

細(xì)胞計數(shù)：?

制備細(xì)胞懸液，?使用消化單層培養(yǎng)細(xì)胞或收集懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，?制成單個細(xì)胞懸液。?

在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格中的細(xì)胞數(shù)，?細(xì)胞壓中線時，?只計左側(cè)和上方者，?不計右側(cè)和下方者。?

熒光顯微鏡使用：?

使用熒光染料對細(xì)胞進(jìn)行染色，?并觀察細(xì)胞所發(fā)出的熒光信號，?以研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。?

聚合酶鏈反應(yīng)（?PCR）?：?

準(zhǔn)備PCR反應(yīng)所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?

按照PCR反應(yīng)液配制表制備反應(yīng)液。?

在反應(yīng)器中加入反應(yīng)液，?開始PCR反應(yīng)。?

PCR反應(yīng)的成功與否，?可以通過電泳、?測序等方法進(jìn)一步確認(rèn)。?

轉(zhuǎn)染：?

準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細(xì)胞。?

制備轉(zhuǎn)染試劑，?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中，?與細(xì)胞混合均勻。?

處理轉(zhuǎn)染細(xì)胞，?并進(jìn)行下一步實驗。?

在操作過程中，?應(yīng)注意實驗室安全規(guī)范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時登記購買耗材或試劑，?保持實驗環(huán)境的清潔和安全

下列是公司正在出售的產(chǎn)品：