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hFOB 1.19細(xì)胞,人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞

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更新時間：2017-11-03 10:36:18瀏覽次數(shù)：135次

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細(xì)胞

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上海研盟生物科技有限公司

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產(chǎn)品簡介

上海研盟生物提供美國ATCC傳代細(xì)胞株“hFOB 1.19細(xì)胞,人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞"，進(jìn)口來源，國內(nèi)保種，活性保證，咨詢：.

詳細(xì)介紹

【友情提示】：產(chǎn)品價格與說明書請?zhí)砑涌头騺黼娫儍r，索要說明書；

產(chǎn)品名稱：hFOB 1.19細(xì)胞,人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞

細(xì)胞特性

組織來源：骨；成骨細(xì)胞；以SV40巨細(xì)胞抗原轉(zhuǎn)染
培養(yǎng)條件：DMEM:F12 +0.3 mg/mL G418 +10% FBS；33.5℃培養(yǎng)
形態(tài)：貼壁
背景：在0.6mg/mL*G418存在下，用溫度敏感的表達(dá)載體pUCSVisA58轉(zhuǎn)染自然的胎兒四肢組織，建立了此細(xì)胞系。在許可溫度33.5℃下細(xì)胞分裂很快，而在限制溫度39.5℃下細(xì)胞極少分裂或不分裂。這些細(xì)胞具有分化為表達(dá)造骨細(xì)胞表型的成熟造骨細(xì)胞的能力。這些細(xì)胞提供了一個同質(zhì)化的快速增殖模型系統(tǒng)，用于研究正常人造骨細(xì)胞的分化，造骨細(xì)胞和激素，生長因子，和對造骨細(xì)胞的功能及分化有影響的細(xì)胞因子。

含量：>1x10的6次方個/mL
污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

基本特性：
描述：（1）所有細(xì)胞株購自ATCC；
（2）公司可提供新鮮或凍存細(xì)胞株；
（3）細(xì)胞株數(shù)量約 1000000個/瓶；
（4）不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌

密度超過90%,并且細(xì)胞狀態(tài)很好時,則復(fù)溫后2個小時需要立即傳代，提供復(fù)蘇好的細(xì)胞株，貼壁及懸浮細(xì)胞形式，細(xì)胞狀態(tài)良好，飽滿、光澤度好，*，并提供細(xì)胞報價、所需培養(yǎng)基、種屬來源、組織來源、形態(tài)、背景資料等。

復(fù)蘇細(xì)胞注意事項(xiàng)：
1收到細(xì)胞后當(dāng)天換液，全部更換成客戶自己的新鮮培養(yǎng)基，放進(jìn)培養(yǎng)箱，第二天再消化。
2邊觀察邊消化，根據(jù)細(xì)胞的形態(tài)，終止消化時間，采取以半分鐘間隔吹打細(xì)胞邊緣，如可吹打下來，即終止消化?？蛻裘鞅容^好的消化時間。
3隨細(xì)胞有一份細(xì)胞操作說明書，請客戶仔細(xì)查看。
4記得加1%雙抗，降低被污染的概率。另外盡早凍存留種，以備后用。
5售后時間為一周，*于細(xì)胞本身的質(zhì)量問題，而因乙方自己不當(dāng)操作（不規(guī)范操作，消化過度，不加雙抗導(dǎo)致的污染等）導(dǎo)致的細(xì)胞問題不在售后范疇。
6收到細(xì)胞后，如細(xì)胞狀態(tài)不佳，或培養(yǎng)中遇到問題，煩請當(dāng)天盡快，以便處理。當(dāng)天及時反饋細(xì)胞情況和細(xì)胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù)，請您務(wù)必重視。
7剛收到細(xì)胞時，胎牛血清可以用15%培養(yǎng)兩三天，利于細(xì)胞盡快恢復(fù)狀態(tài)，細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后，再調(diào)回10%即可。
（其中1,2條針對于貼壁細(xì)胞，懸浮細(xì)胞詳情請見細(xì)胞操作說明書）

細(xì)胞用途：僅供科研使用。

hFOB 1.19細(xì)胞,人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞復(fù)蘇方法

1．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴(yán)，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。

2．迅速放入盛有36℃～37℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。

3．剪開紗布口袋，取出安剖，用70％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細(xì)胞懸液，裝入離心管中，再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液，吹打使細(xì)胞懸浮。

4．低速離心（500～1000轉(zhuǎn)/分）5分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。

5．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。

我公司認(rèn)為購買細(xì)胞的客戶有培養(yǎng)細(xì)胞的經(jīng)驗(yàn)，客戶收到細(xì)胞，原瓶里的培養(yǎng)液可以收集繼續(xù)使用，在*次消化傳瓶時，我們要求客戶留一瓶細(xì)胞繼續(xù)使用我們的培養(yǎng)液，其它瓶的細(xì)胞客戶可使用自己的培養(yǎng)液，這樣可減少由于細(xì)胞不適應(yīng)培養(yǎng)液導(dǎo)致的細(xì)胞問題。

來源有保障（世界*品牌），狀態(tài)且傳代次數(shù)好，經(jīng)測試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。每管含有細(xì)胞數(shù)>1000000個，具有高品質(zhì)、高純度、高穩(wěn)定性等特點(diǎn)，純化技術(shù)保證產(chǎn)品性能。
運(yùn)輸方式：活細(xì)胞運(yùn)輸（T-25 flasks）。
細(xì)胞純度：95%。
細(xì)胞來源：ATCC等。
包裝：內(nèi)層無菌自封袋，防壓泡沫盒，外層防壓保溫氣泡袋，說明書。

用途：本產(chǎn)品只提供給進(jìn)一步的科研使用，不可應(yīng)用于治療等其他方面。

細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存.

，細(xì)胞描述：在0.6mg/ml*G418存在下，用溫度敏感的表達(dá)載體pUCSVisA58轉(zhuǎn)染自然流chan的胎兒四肢組織，建立了此細(xì)胞系。在許可溫度33.5oC下細(xì)胞分裂很快，而在限制溫度39.5oC下細(xì)胞極少分裂或不分裂。這些細(xì)胞具有分化為表達(dá)造骨細(xì)胞表型的成熟造骨細(xì)胞的能力。這些細(xì)胞提供了一個同質(zhì)化的快速增殖模型系統(tǒng)，用于研究正常人造骨細(xì)胞的分化，造骨細(xì)胞激素，生長因子，和對造骨細(xì)胞的功能及分化有影響的細(xì)胞因子。在本庫通過支原體檢測。在本庫通過STR檢測。

動物種別：人

組織來源：骨；成骨細(xì)胞；以SV40巨細(xì)胞抗原轉(zhuǎn)染

形態(tài)：

培養(yǎng)基和添加劑：D-MEM/F-12培養(yǎng)基(GIBCO,貨號12400024，添加L-glutamine 150mg/L, NaHCO3 1.5g/L)，90%；0.3mg/ml G418；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：33.5攝氏度。

REFERENCE：Harris SA , Spelsberg TC . Immortalized human fetal osteoblastic cells. US Patent 5,681,701 dated Oct 28 1997 Harris SA , et al. Development and characterization of a conditionally immortalized human fetal osteoblastic cell line. J. Bone Miner. Res. 10: 178-186, 1995. PubMed: 7754797 Jacobs CR , et al. Differential effect of steady versus oscillating flow on bone cells. J. Biomech. 31: 969-976, 1998. PubMed: 9880053

注意事項(xiàng)

1. 收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們。

2. 所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

本公司的細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程，供參考
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基(DMEM，GIBCO，貨號11965-092)，90%；胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，先要消化處理并進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。消化方法按照細(xì)胞傳代方法的1-3步驟進(jìn)行，zui后的重懸液使用血清。懸浮細(xì)胞直接計(jì)數(shù)后離心，用血清重懸浮，加DMSO至zui終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。

傳代時間：2-3天 3-5天

傳代比例：1:2~1:3 1:1~1:2

細(xì)胞活力：95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)安全性：所有細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細(xì)胞后，在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個細(xì)胞生長情況。

研盟生物其他優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品：

phospho-VAV1 (Tyr160) 磷酸化鳥苷酸轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體
phospho-VAV1 (Tyr174) 磷酸化鳥苷酸轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體
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Claudin 14 緊密連接蛋白14抗體
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phospho-Alpha synuclein (Tyr136) 磷酸化核突觸蛋白α抗體

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NRK-52E細(xì)胞，大鼠腎細(xì)胞, NRK-52E細(xì)胞
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OS-RC-2 細(xì)胞，腎癌細(xì)胞 OS-RC-2 細(xì)胞
P19 細(xì)胞，小鼠畸胎瘤細(xì)胞 P19 細(xì)胞
P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] 細(xì)胞，小鼠骨髓瘤細(xì)胞 P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] 細(xì)胞
P388D1 細(xì)胞，小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞 P388D1 細(xì)胞
P3X63Ag8 細(xì)胞，小鼠骨髓瘤細(xì)胞 P3X63Ag8 細(xì)胞
P3X63Ag8.653 細(xì)胞，小鼠骨髓瘤細(xì)胞 P3X63Ag8.653 細(xì)胞
P815 細(xì)胞，小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞 P815 細(xì)胞
PA317 細(xì)胞，小鼠成纖維細(xì)胞 PA317 細(xì)胞
PANC-1 細(xì)胞，胰腺癌細(xì)胞 PANC-1 細(xì)胞