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MRC-5細(xì)胞,人胚肺細(xì)胞

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所  在  地上海市

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更新時(shí)間:2017-10-20 10:57:15瀏覽次數(shù):285次

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經(jīng)營(yíng)模式:生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品:9950條

所在地區(qū):上海上海市

聯(lián)系人:辛妍 (銷售)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

上海研盟生物提供美國(guó)ATCC傳代細(xì)胞株“MRC-5細(xì)胞,人胚肺細(xì)胞",進(jìn)口來(lái)源,國(guó)內(nèi)保種,活性保證,咨詢:.

詳細(xì)介紹

 

【友情提示】:產(chǎn)品價(jià)格與說(shuō)明書請(qǐng)?zhí)砑涌头騺?lái)電詢價(jià),索要說(shuō)明書;

產(chǎn)品名稱:MRC-5細(xì)胞,人胚肺細(xì)胞

細(xì)胞特性

組織來(lái)源:肺
培養(yǎng)條件:MEM +10% FBS
形 態(tài):貼壁;成纖維細(xì)胞樣
背 景:MRC-5細(xì)胞系來(lái)自14周齡男性胎兒的正常肺組織,該細(xì)胞老化前能傳代42到46次群體倍增。 它是正常二倍體細(xì)胞系,46,XY核型。 模式染色體數(shù)為46,概率為70%。

含量:>1x10的6次方 個(gè)/mL
污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

培養(yǎng)基和添加劑:MEM培養(yǎng)基(GIBCO,貨號(hào)41500034,添加NaHCO3 1.5g/L,Sodium Pyruvate 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度。
REFERENCE:Jacobs JP , et al. Characteristics of a human diploid cell designated MRC-5. Nature 227: 168-170, 1970. PubMed: 4316953 Proc. Symp. Human Diploid Cells. Zagreb, Yugoslavia: Yugoslav Acad. Sci. Arts; 1970, pp. 43-55. Holliday R , Tarrant GM . Altered enzymes in ageing human fibroblasts. Nature 238: 26-30, 1972. PubMed: 12635262 Lewis CM , Tarrant GM . Error theory and ageing in human diploid fibroblasts. Nature 239: 316-318, 1972. PubMed: 12635218 Landers JE , et al. Translational enhancement of mdm2 oncogene expression in human tumor cells containing a stabilized wild-type p53 protein. Cancer Res. 57: 3562-3568, 1997. PubMed: 9270029 Kaur A , et al. Cytotoxic T-lymphocyte responses to cytomegalovirus in normal and simian immunodeficiency virus-infected Rhesus macaques. J. Virol. 70: 7725-7733, 1996. PubMed: 8892893 MOLECULAR THERAPY 11(4):531,2005

 

基本特性:
描述:(1)所有細(xì)胞株購(gòu)自ATCC;
(2) 公司可提供新鮮或凍存細(xì)胞株;
(3) 細(xì)胞株數(shù)量約 1000000個(gè)/瓶;
(4) 不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌

密度超過(guò)90%,并且細(xì)胞狀態(tài)很好時(shí),則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代,提供復(fù)蘇好的細(xì)胞株,貼壁及懸浮細(xì)胞形式,細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿、光澤度好,*,并提供細(xì)胞報(bào)價(jià)、所需培養(yǎng)基、種屬來(lái)源、組織來(lái)源、形態(tài)、背景資料等。

 


MRC-5細(xì)胞,人胚肺細(xì)胞復(fù)蘇方法細(xì)胞用途:僅供科研使用。
                       

1.從液氮罐中取出安剖;有時(shí)因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。

2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。

3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺(tái)上打開蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。

4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。

5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。

 我公司認(rèn)為購(gòu)買細(xì)胞的客戶有培養(yǎng)細(xì)胞的經(jīng)驗(yàn),客戶收到細(xì)胞,原瓶里的培養(yǎng)液可以收集繼續(xù)使用,在*次消化傳瓶時(shí),我們要求客戶留一瓶細(xì)胞繼續(xù)使用我們的培養(yǎng)液,其它瓶的細(xì)胞客戶可使用自己的培養(yǎng)液,這樣可減少由于細(xì)胞不適應(yīng)培養(yǎng)液導(dǎo)致的細(xì)胞問(wèn)題。
 

來(lái)源有保障(世界*品牌),狀態(tài)且傳代次數(shù)好,經(jīng)測(cè)試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。每管含有細(xì)胞數(shù)>1000000個(gè),具有高品質(zhì)、高純度、高穩(wěn)定性等特點(diǎn),純化技術(shù)保證產(chǎn)品性能。
運(yùn)輸方式:活細(xì)胞運(yùn)輸(T-25 flasks)。
細(xì)胞純度:95%。
細(xì)胞來(lái)源:ATCC等。
包裝:內(nèi)層無(wú)菌自封袋,防壓泡沫盒,外層防壓保溫氣泡袋,說(shuō)明書。

用途:本產(chǎn)品只提供給進(jìn)一步的科研使用,不可應(yīng)用于治療等其他方面。

細(xì)胞凍存
1.將細(xì)胞消化下來(lái),移入離心管離心,棄上清
2.準(zhǔn)備凍存液比例:50%FBS+40%培養(yǎng)基+10%DMSO(現(xiàn)用現(xiàn)配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi).
放入-20度冰箱2-4小時(shí)后.再放入-80度冰箱過(guò)夜,第二天放入液氮罐保存.

 

本公司的細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基(DMEM,GIBCO,貨號(hào)11965-092),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),先要消化處理并進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。消化方法按照細(xì)胞傳代方法的1-3步驟進(jìn)行,zui后的重懸液使用血清。懸浮細(xì)胞直接計(jì)數(shù)后離心,用血清重懸浮,加DMSO至zui終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。

傳代時(shí)間:2-3天 3-5天

傳代比例:1:2~1:3  1:1~1:2

細(xì)胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)安全性:所有細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細(xì)胞后,在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

研盟生物其他優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品:

抗丙型肝炎病毒核心抗原單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株,HCV-C39
抗乙型肝炎病毒表面抗原單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株,HBS-r6
小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞,F(xiàn)IB 1-11
小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞,F(xiàn)IB 2-11
小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞,F(xiàn)T 2-14
小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞,F(xiàn)U 1-74
小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞,F(xiàn)U 2-16

小鼠雜交瘤細(xì)胞,D61-18,IgA
小鼠雜交瘤細(xì)胞,19GD6
小鼠雜交瘤細(xì)胞,D10-G/u
小鼠雜交瘤細(xì)胞,16AC5
小鼠雜交瘤細(xì)胞,10EF10
小鼠雜交瘤細(xì)胞,D47-u
小鼠雜交瘤細(xì)胞,D10-1A/u
小鼠雜交瘤細(xì)胞,19DF10
小鼠雜交瘤細(xì)胞,D61-NEW
小鼠雜交瘤細(xì)胞,I41
小鼠雜交瘤細(xì)胞,D47-AF,IgA
小鼠雜交瘤細(xì)胞,16DC9-A
小鼠雜交瘤細(xì)胞,T33-22A
小鼠雜交瘤細(xì)胞,16CD11-G
小鼠雜交瘤細(xì)胞,16BB5
小鼠雜交瘤細(xì)胞,16CF7
小鼠雜交瘤細(xì)胞,16CD11-A
小鼠雜交瘤細(xì)胞,I41-AG
小鼠雜交瘤細(xì)胞,19HC5
小鼠雜交瘤細(xì)胞,16CF7-A5
小鼠雜交瘤細(xì)胞,4E-BP1
小鼠雜交瘤細(xì)胞,ABL2
小鼠雜交瘤細(xì)胞,Akt2
小鼠雜交瘤細(xì)胞,Akt3
小鼠雜交瘤細(xì)胞,AMACR
小鼠雜交瘤細(xì)胞,APOA1
小鼠雜交瘤細(xì)胞,APOA5
小鼠雜交瘤細(xì)胞,ApoM
小鼠雜交瘤細(xì)胞,APP
小鼠雜交瘤細(xì)胞,AURKB
小鼠雜交瘤細(xì)胞,BCL-10
小鼠雜交瘤細(xì)胞,BLK
小鼠雜交瘤細(xì)胞,BNP1

關(guān)鍵詞:培養(yǎng)箱 顯微鏡
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