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閱讀：244發(fā)布時(shí)間：2017-9-5
ELISA實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的采納和保留
優(yōu)異的試劑，良好的儀器和的操作是確保ELISA檢查成果牢靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的構(gòu)成不一樣而有所區(qū)別，國內(nèi)醫(yī)學(xué)查驗(yàn)通常均用板式點(diǎn)。
這篇文章將敘說板式ELISA試劑盒各個(gè)操作過程的留意關(guān)鍵，珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特別儀器合作使用，兩者均有詳細(xì)的使用說明，嚴(yán)格遵循規(guī)則操作，必能得出的成果。
可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本非常廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、大便）等均可作標(biāo)本以測(cè)定其間某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定（如血清、尿液），有些則需經(jīng)預(yù)處理（如大便和某些分泌物）。大多數(shù)ELISA檢查均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚富含纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只需待血清自然凝結(jié)、除特別情況外，在醫(yī)學(xué)查驗(yàn)中均以血清作為檢查標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可同等使用。
血清標(biāo)本可按常規(guī)辦法收集，應(yīng)留意防止溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為符號(hào)的ELISA測(cè)定中，溶血標(biāo)本也許會(huì)添加非特異性顯色。
血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢查。如有細(xì)菌污染，菌體中也許富含內(nèi)源性HRP，也會(huì)發(fā)作假陽性反應(yīng)。如在冰箱中保留過久，其間的可發(fā)作聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。通常說來，在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃，超越一星期測(cè)定的需低溫冰存。凍住血清融解后，蛋白質(zhì)部分濃縮，分布不均，應(yīng)充沛混勻宜輕緩，防止氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩?；鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過濾，澄清后再檢查。重復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)下跌，所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保留作多次檢查，宜少數(shù)分裝冰存。保留血清自收集時(shí)就應(yīng)留意無菌操作，也可參加恰當(dāng)防腐劑。
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