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Cas9穩(wěn)定表達的人胃癌細胞;MKN-45-Cas9-526

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更新時間:2017-11-07 11:11:58瀏覽次數(shù):343次

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細胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達的人胃癌細胞;MKN-45-Cas9-526
形態(tài)特性 圓形
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使MKN45細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo,經400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 RPMI 16

細胞名稱  Cas9穩(wěn)定表達的人胃癌細胞;MKN-45-Cas9-526
形態(tài)特性   圓形
生長特性  貼壁生長
Cas9穩(wěn)定表達的人胃癌細胞;MKN-45-Cas9-526

特征特性   該細胞是采用慢病毒感染的方式使MKN45細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo,經400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。

培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  20%FBS;400ug/ml G418 
傳代方法   建議初始濃度2.0×105 cells/ml,1:3傳代;4~5天1次。
傳代情況  C3
凍存條件   基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS 

購買細胞注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內多余的培養(yǎng)基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件;建議直接購買提供的*培養(yǎng)基。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術部溝通交流。

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