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公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商，提供人永生化淋巴細(xì)胞；CNLMG-B5537LC 的報(bào)價(jià)，咨詢，稱技術(shù)服務(wù)，咨詢選購(gòu)。
細(xì)胞名稱  人永生化淋巴細(xì)胞；CNLMG-B5537LC  
形態(tài)特性   淋巴母細(xì)胞樣  
生長(zhǎng)特性  懸浮生長(zhǎng)  
特征特性   該細(xì)胞屬保藏，其特征特性尚未公開。   
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS  
傳代方法   1:3傳代，3-4天傳1次  
傳代情況  C10  
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　  
支原體檢測(cè)  陰性　  
STR    
同工酶    
染色體    
使用權(quán)限  未定培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，即對(duì)培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。

2、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH：細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動(dòng)物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

操作步驟：
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
胞那樣有較大的縫隙腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞缺乏內(nèi)皮細(xì)胞的窗孔結(jié)構(gòu)，其液相物質(zhì)胞飲水平較低；腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞具有不對(duì)稱定位酶和載體介導(dǎo)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)，從而產(chǎn)生 “兩極分化”的表現(xiàn)型。 與外周內(nèi)皮細(xì)胞相同，大腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞表面表達(dá)細(xì)胞粘附分子，調(diào)控白細(xì)胞進(jìn)入大腦。由于微血管內(nèi)皮細(xì)胞的器官特異性，內(nèi)皮細(xì)胞通常取源于疾病研究的相關(guān)組織。  
細(xì)胞特性  
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的腦動(dòng)脈組織。  
2)細(xì)胞鑒定：血管假性血友病子（WF）免疫熒光染色為陽(yáng)性。  
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。  
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：鋪路石狀細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。  
腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞  
細(xì)胞詳述  
腦動(dòng)脈為肌型動(dòng)脈，管壁薄，血管周圍沒(méi)有支持組織。但腦動(dòng)脈血管內(nèi)膜厚，有發(fā)達(dá)的內(nèi)彈力膜。  
血管新生是從原有血管系統(tǒng)的內(nèi)皮細(xì)胞增殖、游走而形成新的子代血管分支的過(guò)程。腦動(dòng)脈新生可以重建有效血供，從而改善多發(fā)性、彌漫性腦動(dòng)脈粥樣硬化所致的腦缺血，zui終預(yù)防癡呆和腦梗死發(fā)生。  
細(xì)胞特性  
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的腦動(dòng)脈組織。  
2)細(xì)胞鑒定：血管假性血友病子（WF）免疫熒光染色為陽(yáng)性。  
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。  
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：鋪路石狀細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。  
腦血管周細(xì)胞  
細(xì)胞詳述  
腦血管周細(xì)胞分布于腦組織的微血管系統(tǒng)中，調(diào)節(jié)血管形成、穩(wěn)定和功能的關(guān)鍵素。周細(xì)胞典型的特征是有一個(gè)突出的核，核周圍胞漿較少，有許多平行于微血管長(zhǎng)軸的突起，這些突起逐漸變細(xì)并包繞微血管腔，起到對(duì)管腔的支持作用。同時(shí)，一個(gè)周細(xì)胞可以通過(guò)伸展的突起與微循環(huán)中的多個(gè)毛細(xì)血管接觸。此外，周細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞間的相互作用在血管新生中具有極為重要的作用。  
細(xì)胞特性  
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常腦組織。  
2)細(xì)胞鑒定：平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）免疫熒光染色為陽(yáng)性。  
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。  
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：長(zhǎng)梭形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。  
腦膜細(xì)胞  
細(xì)胞詳述  
腦膜是緊貼腦表面和腦室內(nèi)面的一層透明薄膜，內(nèi)含豐富的血管。在腦室與室管膜上皮共同形成脈絡(luò)叢產(chǎn)生腦脊液。腦膜的病變導(dǎo)致腦脊液動(dòng)力學(xué)改變，從而形成腦脊液壓力增高，zui終導(dǎo)致腦積水。目前關(guān)于腦積水的發(fā)病機(jī)制，研究認(rèn)為腦脊液循環(huán)障礙可能與腦膜纖維化密切相關(guān)。腦膜細(xì)胞是組成腦膜纖維化的主要細(xì)胞。  
細(xì)胞特性  
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常腦組織。  
2)細(xì)胞鑒定：波形蛋白（imentin）免疫熒光染色為陽(yáng)性。  
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。  
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：梭形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。  
腦皮質(zhì)神經(jīng)元  
細(xì)胞詳述  
神經(jīng)元，又稱神經(jīng)細(xì)胞，是構(gòu)成神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。  
神經(jīng)元是具有長(zhǎng)突觸（軸突）的細(xì)胞，它由細(xì)胞體和細(xì)胞突起構(gòu)成。在長(zhǎng)的軸突上套有一層鞘，組成神經(jīng)纖維，它的末端的細(xì)小分支叫做神經(jīng)末梢。細(xì)胞體位于腦、脊髓和神經(jīng)節(jié)中，細(xì)胞突起可延伸至全身各器官和組織中。  
細(xì)胞特性  
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常腦組織。  
2)細(xì)胞鑒定：NSE免疫熒光染色為陽(yáng)性。  
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。  
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。  
海馬神經(jīng)元  
細(xì)胞詳述  
海馬體主要負(fù)責(zé)記憶和學(xué)習(xí)，日常生活中的短期記憶都儲(chǔ)存在海馬體中。  
神經(jīng)元是構(gòu)成神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。神經(jīng)元具有長(zhǎng)突起，由細(xì)胞體和細(xì)胞突起構(gòu)成。  
細(xì)胞特性  
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常腦組織。  
2)細(xì)胞鑒定：NSE免疫熒光染色為陽(yáng)性。  
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。  
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。