犬ELISA試劑盒用于測定血清、血漿及相關(guān)液體樣本中的含量。如需更多Elisa試劑盒產(chǎn)品，請來電詳詢。試劑盒嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試劑不同批號組分不得混用。
在犬ELISA試劑盒科研實(shí)驗(yàn)中我們需要注意一些實(shí)驗(yàn)誤差的問題，下面就是為實(shí)驗(yàn)減少誤差的具體操作步驟：
1．實(shí)驗(yàn)使用前，將所有試劑充分搖勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免在實(shí)驗(yàn)加樣時加入大量的氣泡，實(shí)驗(yàn)時在加樣上產(chǎn)生誤差。
2．根據(jù)待檢測樣品的數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需要使用的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品需根據(jù)自己的數(shù)量來定，如在實(shí)驗(yàn)中能使用復(fù)孔的則盡量做復(fù)孔。
3．將稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul加入反應(yīng)孔、并加入待測樣品50ul在反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的*標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩使其均勻，在37℃的條件下溫育1小時。
4．以上實(shí)驗(yàn)結(jié)束后即甩去孔內(nèi)的液體，每孔均加滿洗滌液，振蕩30秒后，甩去孔內(nèi)的洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)操作3次即可。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)則需增加一次。
5．在每孔中加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩使其搖勻，在37℃的條件下溫育30分鐘。
6．將孔內(nèi)的液體甩去，將每個孔中加滿洗滌液，振蕩30秒后，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
7. 將每個孔中均加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩搖勻，在37℃的條件下溫育10分鐘。注意：避免光照。
8．在取出酶標(biāo)板時，即迅速加入50ul終止液，加入終止液后立即測定結(jié)果。
9．zui后即在450nm波長處測定各孔的OD值。
使用說明書樣品收集、處理及保存方法：
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
會員1.png)
