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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品： 進(jìn)口elisa試劑盒，細(xì)胞株，細(xì)胞系，菌種 |
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更新時(shí)間：2022-06-13 14:35:37瀏覽次數(shù)：175
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中文名稱：BL21 Star(DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
英文名稱：BL21 Star(DE3)Chemically Competent Cell
產(chǎn)品規(guī)格：10×100μl|50×100μl
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號：BJ-F0164691
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細(xì)小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn)，本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。產(chǎn)品介紹：
BL21 Star(DE3)感受態(tài)細(xì)胞來源于BL21(DE3)菌株，含有rne131基因突變體，rne131突變基因能夠增菌株細(xì)胞內(nèi)mRNA的穩(wěn)定性，從而提高蛋白表達(dá)能力。 主要適用于T7啟動(dòng)子表達(dá)載體(如pET系列)的高水平蛋白表達(dá)。BL21 Star(DE3)感受態(tài)細(xì)胞由特殊工藝制作，經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率達(dá)107cfu/μg。 保存條件：-80℃ 基因型： F-ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm rne131(DE3) 操作說明: 1.取100μl冰上融化的BL21 Star(DE3)感受態(tài)細(xì)胞，加入目的質(zhì)粒并輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。 2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。 3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基(2YT或LB)，混勻后37℃，200rpm復(fù)蘇60分鐘。 4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。 5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。 注意事項(xiàng): 1.感受態(tài)細(xì)胞好在冰上融化。 2.混入質(zhì)粒時(shí)應(yīng)輕柔操作。 3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?？上鄳?yīng)減少終用于涂板的菌量。 4.誘導(dǎo)時(shí)，IPTG濃度可選(0.1-2mM均可)。 5.為獲得需要量的蛋白，佳誘導(dǎo)時(shí)間、溫度以及 IPTG濃度需實(shí)驗(yàn)者優(yōu)化。 |
使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時(shí)間、編號、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封；每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi)，擰緊蓋，在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本，可以放在同一個(gè)二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，并密封，由專人(2人)運(yùn)送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá)，則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時(shí)間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃～-40℃時(shí)不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
純化線粒體DNA萃取試劑盒
純化線粒體總RNA萃取試劑盒
純化線粒體DNA/RNA同步萃取試劑盒
細(xì)胞/組織線粒體DNA萃取試劑盒
動(dòng)物硬組織線粒體DNA萃取試劑盒
小鼠總紅素(TB)elisa ，英文名： TB ELISA Kit
小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)ELISA檢測試劑盒Mouseai-alpha-FodrinIgG/IgA,α-FodrinIgG/IgAELISAKit 96T/48T
人抗β2糖蛋白I(β2-GPI)抗體(IgG)免疫試劑盒 Human β2-glycoprotein I(β2-GPI)aibody IgG ELISA kit
Rabbittumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AIL-R3ELISAKit兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)elisa規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞FSH-BETA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20次
Humanβ-glucuronidase,βGDelisa人β葡萄糖酸苷酶(βGD)elisa規(guī)格：96T/48T
BL21 Star(DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞豬高爾基蛋白73(GP-73)elisa檢測試劑盒
豬高爾基蛋白73(GP-73)elisa分析檢測試劑盒
豬肝炎病毒細(xì)胞的受體1/腎損傷分子1/KIM1(HAVCR1)elisa檢測試劑盒
豬肝炎病毒細(xì)胞的受體1/腎損傷分子1/KIM1(HAVCR1)elisa分析檢測試劑盒
豬肝細(xì)胞生長因子(HGF)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測
