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上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品： 進口elisa試劑盒，細胞株，細胞系，菌種 |
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- www.bhsy-e.com/
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- 品牌 其他品牌
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- 所在地 上海市
更新時間：2022-06-13 14:35:42瀏覽次數(shù)：154
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中文名稱：B834(DE3)感受態(tài)細胞
英文名稱：B834(DE3) Chemically Competent Cell
產(chǎn)品規(guī)格：10×100μl|50×100μl
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號：BJ-F0164693
產(chǎn)品介紹：
B834是BL21菌株的父系菌株。該系列宿主菌是蛋缺陷型，可以用來高水平，高特異性的使用35S-蛋和硒代蛋標記目的蛋白，進行蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)研究。B834宿主菌也是lon和ompT蛋白酶缺陷型菌株。DE3是溶源性的λDE3，所以帶有T7 RNA聚合酶的染色體拷貝。該菌株適用于pET系列載體，及其他T7啟動子系列載體。 基因型： F-ompT hsdSB(rB-mB-) galdcm met(DE3) 保存：-80℃ 使用說明： 取100μ1冰上融化的B834 (DE3)感受態(tài)細胞，加入目的質(zhì)粒并輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。 向離心管中加入700μ1不含抗生素的無菌培養(yǎng)基(2YT或LB)，混勻后37℃,200rpm復蘇60分鐘。 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μ1左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。 |
使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封；每袋裝一份標本。同時也將標本有關(guān)信息填在標本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi)，擰緊蓋，在容器上標明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標本，可以放在同一個二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(nèi)(或疫苗運輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，并密封，由專人(2人)運送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內(nèi)送達，則應盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
純化線粒體內(nèi)膜功能/膜電位測定試劑盒
活體細胞線粒體內(nèi)膜功能/膜電位測定試劑盒
*線粒體內(nèi)膜功能/膜電位測定試劑盒
活體組織線粒體內(nèi)膜功能/膜電位測定試劑盒
真菌/酵母細胞線粒體內(nèi)膜功能/膜電位測定試劑盒
小鼠組蛋白H2B(H2B)elisa ，英文名： H2B ELISA Kit
山羊γ干擾素(IFN-γ)ELISA檢測試劑盒GoatIerferonγ,IFN-γELISAKit 96T/48T
犬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)免疫試劑盒 Canine Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA Kit
英文名稱Mouse17-ANPELISAKit小鼠17-羥-同(17-ANP)規(guī)格：96T/48T
腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(EerotoxigenicE.coli)鑒定16SrDNAPCR擴增檢測試劑盒20次
RatFreeThyroxine,FT4elisa大鼠游離甲狀(FT4)elisa規(guī)格：96T/48T
B834(DE3)感受態(tài)細胞豬肌酸(CK)elisa檢測試劑盒
豬肌紅蛋白(MB)elisa檢測試劑盒
豬肌U型酸,線粒體(CKMT1)elisa檢測試劑盒
豬饑餓激素(GHRL)elisa檢測試劑盒免費代測
豬活性氧(ROS)elisa檢測試劑盒
生物醫(yī)學實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點，本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
