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上海邦景實業(yè)有限公司
主營產品： 進口elisa試劑盒，細胞株，細胞系，菌種 |
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- www.bhsy-e.com/
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更新時間：2022-06-13 14:36:34瀏覽次數：154
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中文名稱：pUC18 SARS-CoV-2 ORF1ab質粒
英文名稱：pUC18-SARS-CoV-2-ORF1ab
產品規(guī)格：1μg|100μg
發(fā)貨周期：1～3天
產品貨號：BJ-F0164696
生物醫(yī)學實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點，本公司開發(fā)了本產品。產品介紹：
pUC18 SARS-CoV-2 ORF1ab質粒所克隆的ORF1ab(168bp)含有中國疾控中心所公布的SARS-CoV-2冠狀病毒基因組中開放讀碼框ORF1ab(open reading frame 1ab，ORF1ab)熒光檢測RT-PCR特異性引物(1ab-F:5'-CCCTGTGGGTTTTACACTTAA-3'；1ab-R:5'-ACGATTGTGCATCAGCTGA-3'，該對引物擴增產生119bp片段)擴增所包含區(qū)域，該克隆適用于SARS-CoV-2的特異性檢測。 SARS-CoV-2 ORF1大約占整個基因組長度的三分之二，位于病毒基因組5'端，編碼病毒復制酶，包括ORF1a和ORF1b。ORF1a和ORF1b分別編碼兩個多聚蛋白(poly-protein)即pp1a和pp1ab，多聚蛋白產生后，被病毒編碼的類(chymotrypsin-like protease，3CLpro)或1-2個類木瓜蛋白酶(papain-like protease，PLP)水解為具有獨立生物學功能的十六個非結構蛋白(NSP1-NSP16)，其中ORF1a編碼NSP1-NSP11，而ORF1b編碼NSP12-16。 使用說明： 使用1μg包裝的本產品時，請先取少量本質粒轉化大腸桿菌，進行質粒小量、中量或大量抽提后再用于后續(xù)用途。抽提獲得的質粒可以通過酶切電泳進行鑒定，或通過測序進行鑒定。 100μg包裝的本產品質粒濃度為0.1μg/μl，共1ml?？梢灾苯佑糜诿盖?。 |
使用方法：本產品僅用于科研
注意：標本采集人員需按有關規(guī)定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內將本產品分裝到自備的、螺旋蓋內有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內鼻腭處，停留片刻后緩慢轉動退出。以同一拭子拭兩側鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內密封；每袋裝一份標本。同時也將標本有關信息填在標本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內，擰緊蓋，在容器上標明有關信息。同一患者2份以上的密封標本，可以放在同一個二級容器內。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內襯具吸水和緩沖能力的物質。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(或疫苗運輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質填充，并密封，由專人(2人)運送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內送達，則應盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
純化線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒
活體細胞線粒體跟蹤試劑盒
活體細胞線粒體長期跟蹤試劑盒
全血線粒體DNA萃取試劑盒
全血基因組/線粒體DNA同步萃取試劑盒
小鼠總蛋白C(TPC)elisa ，英文名： TPC ELISA Kit
小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA檢測試劑盒Mouselipoproteinα,Lp-αELISAKit 96T/48T
人抗β2糖蛋白I(β2-GPI)抗體(IgM)免疫試劑盒 Human β2-glycoprotein I(β2-GPI)aibody IgM ELISA kit
rabbitTumornecrosisfactorα,TNFαELISAKit兔子壞死因子α(TNF-α)elisa規(guī)格：96T/48T
載玻片細胞ERK蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次
Humanβ-glucosidaseelisa人β葡糖苷酶(β-glucosidase)elisa規(guī)格：96T/48T
pUC18 SARS-CoV-2 ORF1ab質粒豬合成酶(GS)elisa分析檢測試劑盒
豬睪酮(T)elisa檢測試劑盒免費代測
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豬高鐵血紅蛋白(MHB)elisa檢測試劑盒
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