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上海聯(lián)邁生物工程有限公司
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所 在 地上海市
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更新時間：2018-06-08 14:37:04瀏覽次數(shù)：220次
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一站式柱式miRNAOUT 本產(chǎn)品是在本公司沉淀式miRNAout（CAT#:90203）基礎上自主開發(fā)的柱式 升級產(chǎn)品，是目前國內(nèi)外市場上較快速較簡單的小RNA分離純化產(chǎn)品。它具有下列 特點：
1. 樣品處理量大，一次多可以處理2 g的樣品。
一站式柱式miRNAOUT
名稱 | 規(guī)格 | 價格 | 手冊 |
一站式柱式miRNAOUT | 50次 | 790元 |
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本產(chǎn)品是在本公司沉淀式miRNAout（CAT#:90203）基礎上自主開發(fā)的柱式 升級產(chǎn)品，是目前國內(nèi)外市場上zui快速zui簡單的小RNA分離純化產(chǎn)品。它具有下列 特點：
1. 樣品處理量大，一次zui多可以處理2 g的樣品。
2. 一步法直接分離純化小RNA，比Ambion的兩步法和PAGE電泳回收法更簡單。 整個過程只需要二十多分鐘
3. 得到的小RNA長度大部分在200 nt以下，包括5S RNA、tRNA、miRNA、 Pre-miRNA、pri-miRNA、siRNA、shRNA和snRNA等。
4. 小RNA純凈，OD260/280一般都在1.9左右。無基因組DNA的污染?？捎糜?RT-PCR、miRNA標記、microarray等后續(xù)實驗。 5. 產(chǎn)率一般為10-20 μ g/100 mg動物組織，
5-10 μ g/100 mg植物組織。 6. 適用范圍廣，可以用于動物組織、血液、植物等各種實驗材料。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經(jīng)反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質粒DNA又恢復原來的構型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網(wǎng)狀結構，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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