上海宇淳生物科技有限公司
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參考價(jià) | ¥ 530 |
訂貨量 | 1 |
- 型號(hào) 010
- 品牌
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 所在地 上海市
更新時(shí)間:2019-05-09 10:47:16瀏覽次數(shù):920
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CelRed 核酸染料(10,000× DMSO溶液)
CelRed 核酸染料(10,000× DMSO溶液)
CelRed核酸染料特點(diǎn)
● 無(wú)毒性:CelRed *的油性和大分子量特點(diǎn)使其不能穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),艾姆斯氏試驗(yàn)結(jié)果也表明,該染料的誘變性遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于EB。
● 靈敏度高:適用于各種大小片段的電泳染色,對(duì)核酸遷移的影響小于SYBR Green I。
● 穩(wěn)定性高: 適用于使用微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠;室溫下在酸或堿緩沖液中極其穩(wěn)定,耐光性強(qiáng)。
● 信噪比高:樣品熒光信號(hào)強(qiáng),背景信號(hào)低。
● 操作簡(jiǎn)單:與 EB 一樣,在預(yù)制膠和電泳過(guò)程中染料不降解;而電泳后染色過(guò)程也只需30 分鐘且無(wú)需脫色或沖洗 ,即可直接用紫外凝膠透射儀觀察。
● 適用范圍廣:可選擇電泳前染色(膠染法)或電泳后染色(泡染法);適用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳;可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。
● 與EB有相同的光譜特性,無(wú)需改變?yōu)V光片及觀察裝置:標(biāo)準(zhǔn)的 EB 濾光片或 SYBR 濾光片都適用,使用與觀察EB相同的普通紫外凝膠透射儀觀察即可,在 300nm 紫外光附近可得到hao激發(fā)。但是CelRed不能被488 nm氬離子激光器或相似波長(zhǎng)的可見(jiàn)光*激發(fā),因此不推薦使用此類激發(fā)裝置的成像系統(tǒng)。對(duì)于此類裝置,我們推薦您使用CelGreen(Cat# 011或012),它和SYBR Green I的光譜相似,靈敏度相當(dāng),但更加穩(wěn)定。
CelRed使用方法簡(jiǎn)介
1.膠染法(用法同EB)(推薦方法)
(1) 制膠時(shí)加入CelRed 核酸染料(例如:每50mL 瓊脂糖溶液中加入5μL CelRed 10,000× 儲(chǔ)液,
以此比例類推)。
(2) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
注意事項(xiàng):
此方法染色染料用量相對(duì)較少。500 μL染料大約可以做100塊 50mL的膠。
由于CelRed具有良好的熱穩(wěn)定性,可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷卻。搖晃,振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。也可以選擇將CelRed儲(chǔ)液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中,然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。CelRed兼容所有常用的電泳緩沖溶液。
如果總是看到條帶彌散或分離不理想,建議使用泡染法染色以確認(rèn)問(wèn)題是否與染料有關(guān)。如果染色后問(wèn)題依舊存在,則說(shuō)明問(wèn)題與染料無(wú)關(guān),請(qǐng)嘗試:降低瓊脂糖濃度;選用更長(zhǎng)的凝膠;延長(zhǎng)凝膠時(shí)間以保證邊緣清晰;改進(jìn)上樣技巧或選擇泡染法染色。
此方法不適合預(yù)制聚丙烯酰胺凝膠,對(duì)于聚丙烯酰胺凝膠請(qǐng)使用泡染法。
2.泡染法
(1) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
(2) 用H2O將CelRed 10,000× 儲(chǔ)液稀釋約3,300倍到0.1M NaCl中,制成3× 染色液。(例如將15μL CelRed 10,000× 儲(chǔ)液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。
(3) 將凝膠小心地放入合適的容器中,如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的3× 染色液浸沒(méi)凝膠。室溫振蕩染色30min左右,hao染色時(shí)間根據(jù)凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對(duì)于含3.5~10%丙烯酰胺的凝膠,染色時(shí)間通常介于30min到1h,并隨丙烯酰胺含量增加而延長(zhǎng)。
注意事項(xiàng):
用泡染法染色時(shí),染料用量較多。單次使用的染色液可重復(fù)使用3次左右。
3× CelRed染色液可以大量制備,在室溫下避光保存直至用完。
500 μL | ¥530 |