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南京億迅生物科技有限公司
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| 參考價 | ￥ 4270 | ￥ 3200 |
| 訂貨量 | 1 件 | 5 件 |
- 型號
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- 所在地 南京市
更新時間：2019-11-07 10:49:15瀏覽次數(shù)：1073
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乙酰輔酶A檢測試劑盒
測定意義
乙酰輔酶A廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中。是生物體能源物質(zhì)代謝過程中產(chǎn)生的一種重要的中間代謝產(chǎn)物。在體內(nèi)能源物質(zhì)代謝中是一個樞紐性的物質(zhì)。糖、脂肪、蛋白質(zhì)三大營養(yǎng)物質(zhì)通過乙酰輔酶A匯聚成一條共同的代謝通路-三羧酸循環(huán)和氧化磷酸化，經(jīng)過這條通路*氧化生成二氧化碳和水，釋放能量用于ATP合成。此外，乙酰輔酶A是合成脂肪酸，酮體，膽固醇及其衍生物等生理活性物質(zhì)的前體物質(zhì)。
需自備的儀器和用品
紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
試劑一：液體×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1支，-20℃保存。臨用前加入500uL試劑五充分溶解備用。
試劑三：液體×1支，4℃保存。臨用前加入500uL試劑五充分溶解備用。
試劑四：粉劑×1瓶，-20℃保存。臨用前加入45mL試劑五充分溶解備用。
試劑五：液體×1瓶，4℃保存。
工作液的配制：臨用前請根據(jù)擬用工作液體積（樣本數(shù)×0.92 m L），將試劑二、三和四按照1:1:90的比例混合，或者直接把試劑二和試劑三加入到試劑四中混勻（可以測定48樣）；加樣前置37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）水浴鍋中預(yù)熱30 min。
乙酰輔酶A的提取
1、細菌或培養(yǎng)細胞：收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，棄上清，按照每400萬細菌或細胞加入1mL試劑一（如果吸光度太高，可以減少細菌或者細胞數(shù)量；如果吸光度太低，可以減少試劑一體積），超聲波破碎細菌或細胞（功率20％，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），13000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2、組織：稱取約0.1g組織（如果吸光度太高，可以減少組織質(zhì)量），加入1mL試劑一（如果吸光度太低，可以減少試劑一體積）進行冰浴勻漿；13000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
測定步驟
- 分光光度計預(yù)熱30min，用蒸餾水于340nm處調(diào)零。
2、取920uL工作液和100uL樣本至 1mL石英比色皿，混勻，立即記錄340nm處20s的吸光值A1和80s時的吸光值A2，計算ΔA=A2-A1。
乙酰輔酶A檢測試劑盒
