產(chǎn)品應用：

免疫化學法檢測細胞和組織缺氧情況，包括免疫熒光（IF），免疫過氧化物酶，WB或流式細胞分析（FC）；當HypoxyprobeTM-1 Plus Kit結(jié)合anti-FITC抗體檢測小鼠組織，染色背景極其低。

試劑盒組分：

編號 組分名稱 貨號（規(guī)格） 保存方法

HP2-100Kit HP2-200Kit HP2-1000Kit

1 Pimonidazole HCl 100mg 200mg 1000mg 室溫或2-8℃避光

2 4.3.11.3 mouse FITC-MAb 200μl 200μl 2×200μl 2-8℃避光，避免反復凍融

3 Rabbit anti-FITC HRP 200μl 200μl 2×200μl 2-8℃避光，避免反復凍融

試劑盒組分詳細描述：

Hypoxyprobe-1

Hypoxyprobe-1 是2-硝基咪唑的替代物，其化學名和*成分是Pimonidazole hydrochloride（Pimonidazole HCl），分子量為290.8，水溶性為400mM（=116 mg/ml），紫外吸收（324nm）的吸光系數(shù)為7020（0.9%生理鹽水）。

Hypoxyprobe-1的粉末和溶液形式皆具化學穩(wěn)定性。比如，固體形式的Hypoxyprobe-1于柔弱光線下室溫保存2年，UV和HPLC分析法評估無任何降解發(fā)生。溶于0.9%生理鹽水的Hypoxyprobe-1，濃度100g/L置于2-8℃保存4.5年，UV和HPLC分析法評估無任何降解發(fā)生。

作用機理：缺氧細胞中Pimonidazole被還原后得以活化。這一活化的中間物與蛋白質(zhì)、多肽和氨基酸中的巰基基團（thiol groups）形成穩(wěn)定的加合物。Mab1抗體結(jié)合這些加合物從而能借由免疫化學法來檢測。

FITC-MAb1抗體

FITC-MAb1是熒光素偶聯(lián)的小鼠IgG1單克隆抗體（克隆4.3.11.3），濃度為0.5mg/ml（in PBS）。

感興趣組織可用免疫組化檢測（IHC），冰凍切片或者福爾馬林固定的石蠟包埋切片；也可組織降解后用流式分析法檢測；

anti-FITC HRP抗體

本抗體為偶聯(lián)到HRP的兔IgG多克隆抗體。用于檢測福爾馬林石蠟包埋的小鼠腫瘤組織，不僅有強熒光信號，且背景極其低。

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