植物嘔吐毒素(vomitoxin)ELISA試劑盒的使用目的是什么?定性和定量分析各種谷物、飼料及飼料原料、玉米、小麥以及副產(chǎn)物,麥芽啤酒和麥芽汁,微生物,血清,組織,尿等樣本中嘔吐毒素(vomitoxin)殘留的定量檢測(cè)。
植物嘔吐毒素(vomitoxin)ELISA試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,在微孔板包被有嘔吐毒素(vomitoxin)偶聯(lián)抗原,加入嘔吐毒素(vomitoxin)標(biāo)準(zhǔn)品或樣品,游離嘔吐毒素(vomitoxin)與微孔條上預(yù)包被的嘔吐毒素(vomitoxin)偶聯(lián)抗原互相競(jìng)爭(zhēng)抗嘔吐毒素(vomitoxin)抗體酶標(biāo)記物,用TMB底物顯色,加入終止液后顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色,用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè),吸光值與樣品中嘔吐毒素(vomitoxin)含量成反比,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中嘔吐毒素(vomitoxin)的含量。
植物嘔吐毒素(vomitoxin)ELISA試劑盒使用步驟:
1、使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2、根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
3、加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鐘。
4、甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5、每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6、甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7、每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育5分鐘。避免光照。
8、取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
9、在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。