反相柱系列是我們應(yīng)用zui廣泛的色譜柱類型， 反相柱鍵合相主要包括：C18、C8、C4、Phenyl、aQ、等。對于以上反相柱，我們在使用及維護的時候可以按照同樣的操作方式：

　　1、在條件允許情況下，在使用前對新色譜柱按照說明書方法進(jìn)行柱效測試。以確保色譜柱的正常。

　　2、反相柱系列所有硅膠基質(zhì)色譜柱使用溫度應(yīng)低于60℃。

　　3、樣品

　　將樣品溶解在流動相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫，則需要將樣品溶解在初始流動相或極性相近的溶劑中。樣品溶液不應(yīng)含有任何顆粒物，使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過濾。樣品溶液如果使用強溶劑（例如，流動相為水，樣品溶劑為甲醇），為達(dá)到較好峰形，需要降低進(jìn)樣量（以250x4.6mm規(guī)格為例，小于10μL）。

　　4、流動相

　　所有流動相，特別是含有緩沖鹽的流動相，當(dāng)日實驗當(dāng)日配制；如果使用了前日配制的流動相，請確保流動相pH值沒有變化，并確保流動相沒有長菌。 流動相的pH值取決于您的應(yīng)用和色譜柱填料類型。我們建議在所有的色譜柱盡量在pH2~8范圍內(nèi)使用。請盡量避免在常規(guī)流動相中使用很高比例的水（>95%）作為流動相，可能會造成保留時間的不穩(wěn)定或者色譜柱鍵合相的損害。如果使用高比例水或者水相為流動相，建議使用親水柱。

　　5、色譜柱平衡

　　在進(jìn)行分析之前，請使用至少20倍柱體積的流動相沖洗色譜柱，以使色譜柱達(dá)到平衡。

　　色譜柱的柱體積可以通過以下公式估算：

　　V=0.68πr2

　　V為色譜柱柱體積（mL），r為色譜柱內(nèi)徑（cm），L為色譜柱長度（cm）。

　　6、色譜柱保護

　　對于“臟”的樣品以及組分未知的樣品，請盡量使用在線濾器或保護柱，如果可能，使用SPE小柱對樣品進(jìn)行前處理是更好的選擇。上述做法可以有效延長色譜柱使用壽命。是我們應(yīng)用廣泛的色譜柱類型， 反相柱鍵合相主要包括：C18、C8、C4、Phenyl、aQ、等。對于以上反相柱，我們在使用及維護的時候可以按照同樣的操作方式：

　　1、在條件允許情況下，在使用前對新色譜柱按照說明書方法進(jìn)行柱效測試。以確保色譜柱的正常。

　　2、所有硅膠基質(zhì)色譜柱使用溫度應(yīng)低于60℃。

　　3、樣品

　　將樣品溶解在流動相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫，則需要將樣品溶解在初始流動相或極性相近的溶劑中。樣品溶液不應(yīng)含有任何顆粒物，使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過濾。樣品溶液如果使用強溶劑（例如，流動相為水，樣品溶劑為甲醇），為達(dá)到較好峰形，需要降低進(jìn)樣量（以250x4.6mm規(guī)格為例，小于10μL）。

　　4、流動相

　　所有流動相，特別是含有緩沖鹽的流動相，當(dāng)日實驗當(dāng)日配制；如果使用了前日配制的流動相，請確保流動相pH值沒有變化，并確保流動相沒有長菌。 流動相的pH值取決于您的應(yīng)用和色譜柱填料類型。我們建議在所有的色譜柱盡量在pH2~8范圍內(nèi)使用。請盡量避免在常規(guī)流動相中使用很高比例的水（>95%）作為流動相，可能會造成保留時間的不穩(wěn)定或者色譜柱鍵合相的損害。如果使用高比例水或者水相為流動相，建議使用親水柱。

　　5、色譜柱平衡

　　在進(jìn)行分析之前，請使用至少20倍柱體積的流動相沖洗色譜柱，以使色譜柱達(dá)到平衡。

　　色譜柱的柱體積可以通過以下公式估算：

　　V=0.68πr2

　　V為色譜柱柱體積（mL），r為色譜柱內(nèi)徑（cm），L為色譜柱長度（cm）。

　　6、色譜柱保護

　　對于“臟”的樣品以及組分未知的樣品，請盡量使用在線濾器或保護柱，如果可能，使用SPE小柱對樣品進(jìn)行前處理是更好的選擇。上述做法可以有效延長色譜柱使用壽命。