詳細(xì)介紹
尼康的A1R MP 是一款擁有獨(dú)到技術(shù)的雙光子顯微成像系統(tǒng),不僅具備高分辨率檢流計(jì)式掃描器(galvanometer scanner),而且還配備了高速共振式掃描器(resonant scanner)。掃描速率在512 X 512像素水平下高達(dá)到30幀/秒;在帶狀掃描模式下高可達(dá)420幀/秒。新型四通道NDD探測(cè)器(non-descanned detectors)具有更高的探測(cè)效率、更低的暗電流以及更寬的響應(yīng)光譜,可以對(duì)譜線相近的熒光探針進(jìn)行實(shí)時(shí)光譜拆分與識(shí)別,并大大提高熒光圖像的對(duì)比度。此功能對(duì)于雙光子顯微鏡非常重要,因?yàn)樵陔p光子成像時(shí)一般只能使用單一的激發(fā)波長(zhǎng),往往不可避免地造成自發(fā)熒光以及發(fā)射光譜的重疊。
多光子顯微鏡
高達(dá)420幀/秒成像速率的共振掃描鏡
尼康所*的共振掃描技術(shù),較之于非共振的普通掃描器,大幅提高了寬視場(chǎng)掃描速率,達(dá)到了點(diǎn)掃描成像的世界快速率-420幀/秒。利用多光子顯微術(shù)的NDD探測(cè)器,可以對(duì)非常厚的標(biāo)本進(jìn)行深部快速成像。尼康的光學(xué)同步(optical pixel clock)技術(shù)充分保證了超高速圖像的均勻性和穩(wěn)定性。
*1 NDD(Non-Descanned Detector),與共聚焦技術(shù)不同,A1R MP不需要使用小孔濾波(descan)。使得NDD探測(cè)器可以安裝在靠近物鏡出光口的位置,從而可以接收到更多的被厚標(biāo)本散射的信號(hào)光,大幅提高靈敏度。通過(guò)A1RMP的超高速共振掃描,利用紅外飛秒脈沖激光激發(fā)活體組織血管中的血細(xì)胞,并以30幀/秒的速率,三通道同時(shí)拍攝三色熒光圖像。
箭頭標(biāo)記的是對(duì)白細(xì)胞胞核運(yùn)動(dòng)的追蹤。
三種熒光探針同時(shí)成像:細(xì)胞核(藍(lán)),內(nèi)皮細(xì)胞層(綠),血漿(紅)。長(zhǎng)波長(zhǎng)超快激光與超高速掃描器的結(jié)合有效阡低光損傷的同時(shí)提供了高精度時(shí)間分辨率的多光子成像。圖像分辨率:512X512像素,圖像采集速率:30幀/秒,物鏡:60X水鏡。
多光子顯微鏡高靈敏度NDD深部成像
尼康新開(kāi)發(fā)的多光子四通道NDD探測(cè)器能夠有效地進(jìn)行標(biāo)本深部的顯微成像。較普通探測(cè)器而言,NDD的感光元件面積更大,靈敏度更高,并安裝于距離物鏡后出光口(back aperture)近的地方. 該配置有效地提高了對(duì)散射熒光的探測(cè)效率,具有更高的信噪比(S/N),對(duì)諸如活體組織等較厚的標(biāo)本的拍攝,具有比普通共聚焦顯微鏡更為清晰穩(wěn)定的圖像質(zhì)量。
*對(duì)于標(biāo)本深部成像來(lái)說(shuō),非常重要的一點(diǎn)就是要盡可能多地探測(cè)到散射熒光。而實(shí)際探測(cè)深度主要取決于探測(cè)器的靈敏度、受光面積以及安裝位置。