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當(dāng)前位置:西安百螢生物科技有限公司>>trFluor™ 染料和試劑盒>>檢測(cè)試劑盒>> 22836Cell Meter 磷脂酰*細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒

Cell Meter 磷脂酰*細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒

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產(chǎn)品型號(hào)22836

品       牌AAT Bioquest

廠商性質(zhì)代理商

所  在  地西安市

更新時(shí)間:2024-01-31 11:08:23瀏覽次數(shù):106次

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Cell Meter 磷脂酰*細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 是一套用于檢測(cè)細(xì)胞生存力的工具。有多種參數(shù)可用于檢測(cè)細(xì)胞活力。該特定試劑盒旨在通過測(cè)量磷脂酰*(PS)的轉(zhuǎn)運(yùn)來(lái)檢測(cè)細(xì)胞凋亡。

我們的Cell Meter 磷脂酰*細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 是一套用于檢測(cè)細(xì)胞生存力的工具。有多種參數(shù)可用于檢測(cè)細(xì)胞活力。該特定試劑盒旨在通過測(cè)量磷脂酰*(PS)的轉(zhuǎn)運(yùn)來(lái)檢測(cè)細(xì)胞凋亡。在細(xì)胞凋亡中,PS轉(zhuǎn)移到質(zhì)膜的外部小葉。磷脂酰*在細(xì)胞表面的出現(xiàn)是細(xì)胞凋亡初始/中間階段的普遍指標(biāo),可以在觀察形態(tài)變化之前進(jìn)行檢測(cè)。該試劑盒中使用的我們專有的Apopxin PS指示劑是基于小分子的PS指示劑。綠色熒光染料在405 nm處被紫色激光充分激發(fā),并在?520 nm處發(fā)出強(qiáng)烈的綠色熒光。該試劑盒經(jīng)過優(yōu)化,可與裝有Violet Laser的流式細(xì)胞儀一起使用。它特別適用于細(xì)胞的多色流式細(xì)胞術(shù)分析。除顯微鏡和流式細(xì)胞儀平臺(tái)外,該試劑盒還可與熒光酶標(biāo)儀一起使用。百螢生物是AAT Bioquest的中國(guó)代理商,為您提供的Cell Meter 磷脂酰*細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒。

樣品實(shí)驗(yàn)方案

簡(jiǎn)要概述

  1. 用測(cè)試化合物制備細(xì)胞(200 µL /樣品)

  2. 添加Apopxin 紫色500測(cè)定溶液

  3. 在室溫下孵育30至60分鐘

  4. 使用帶有525/40 nm濾光片(AmCyan通道)的流式細(xì)胞儀或帶有紫色濾光片組的熒光顯微鏡分析細(xì)胞


實(shí)驗(yàn)步驟

1.用Apopxin Violet 500制備和孵育細(xì)胞:

1.1用測(cè)試化合物處理細(xì)胞一段時(shí)間(對(duì)于用星形孢菌素處理過的Jurkat細(xì)胞,需要4-6小時(shí))以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。

1.2離心細(xì)胞以獲得1-5×105細(xì)胞/管。

1.3將細(xì)胞重懸于200 µL分析緩沖液(組分B)中。

1.4向細(xì)胞中加入2 µL Apopxin 紫色500(組分A)。

1.5可選:向壞死細(xì)胞中加入2µL 100X碘化丙啶(組分C)。

1.6避光保存,于室溫下孵育30至60分鐘。

1.7在使用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡分析細(xì)胞之前,添加300 µL分析緩沖液(組分B)以增加體積。

1.8使用帶有525/40 nm濾光片的流式細(xì)胞儀(AmCyan通道)或帶有紫色濾光片組的熒光顯微鏡檢測(cè)熒光強(qiáng)度。

2.通過使用流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析:

2.1使用帶有525/40 nm濾光片(AmCyan通道)的流式細(xì)胞儀定量Apopxin Violet 500。 將碘化丙啶加入細(xì)胞后,使用610/20 nm濾光片(PE-Texas red通道)檢測(cè)細(xì)胞活力。 注意:由于對(duì)細(xì)胞的分離或收獲過程中可能會(huì)發(fā)生特定的膜損傷,因此不對(duì)貼壁細(xì)胞的Apopxin 結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行常規(guī)測(cè)試。

3.通過使用熒光顯微鏡進(jìn)行分析:

3.1孵育后用移液管吸移細(xì)胞懸液,用測(cè)定緩沖液沖洗1-2次,然后用測(cè)定緩沖液重懸細(xì)胞。

3.2將細(xì)胞添加到載玻片上。 注意:對(duì)于貼壁細(xì)胞,建議直接在蓋玻片上生長(zhǎng)細(xì)胞。 與Apopxin Violet 500孵育后,用Assay Buffer沖洗1-2次,然后將Assay Buffer加到蓋玻片上。 將玻片上的蓋玻片倒置并可視化細(xì)胞。 與Apopxin Violet 500孵育后,還可以將細(xì)胞固定在2%甲醛中,并在顯微鏡下觀察。

3.3在帶有紫色濾光片的熒光顯微鏡下,用Apopxin 紫色500分析凋亡細(xì)胞。當(dāng)?shù)饣ぬ砑拥郊?xì)胞中時(shí),使用TRITC濾波片檢測(cè)細(xì)胞活力。 質(zhì)膜上的藍(lán)色染料表明Apopxin Violet 500與細(xì)胞表面的PS結(jié)合。



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