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廣州健侖生物科技有限公司
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所 在 地廣州市
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更新時間:2017-04-27 09:45:26瀏覽次數(shù):478次
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從福爾馬林固定、石蠟包埋的組織切片中純化總RNA
石蠟RNA提取試劑盒
簡介:
從福爾馬林固定、石蠟包埋的組織切片中純化總RNA
1.創(chuàng)新的方法用于克服福爾馬林造成的交聯(lián)
2.有效的釋放RNA而不破壞其完整性
3.高效的實(shí)驗(yàn)方案,在85分鐘內(nèi)即可獲得純化的RNA
RNeasy FFPE Kit專為從福爾馬林固定、石蠟包埋的組織切片中純化總RNA而設(shè)計(jì)。*的裂解和孵育條件逆轉(zhuǎn)福爾馬林對RNA的修飾。并且裂解緩沖液可將RNA從組織切片中有效釋放出來,防止RNA的進(jìn)一步降解。試劑盒同樣使用DNase和DNase Booster Buffer優(yōu)化,去除基因組DNA的污染。使用RNeasy MinElute離心柱純化獲得的總RNA,洗脫體積可小至10 μl。整個純化流程可在QIAcube*上全自動進(jìn)行。
詳細(xì)信息:(產(chǎn)品咨詢:/)
性能
使用RNeasy FFPE Kit從固定和包埋的樣本中純化獲得的RNA的產(chǎn)量比用其他方法更高。回收得到的完整RNAzui小可達(dá)70 nt,并且?guī)缀鯖]有基因組DNA的污染。用該試劑盒從FFPE樣本中純化得到的RNA 片段非常適用于real-time RT-PCR等敏感的下游應(yīng)用。
原理
用福爾馬林固定組織會導(dǎo)致RNA-RNA和RNA-蛋白質(zhì)的交聯(lián),這會影響RNA在酶學(xué)分析中的性能。FFPE樣本固定和包埋同樣會導(dǎo)致核酸的嚴(yán)重片段化。RNeasy FFPE Kit提供了*的裂解和孵育條件來逆轉(zhuǎn)福爾馬林對RNA的修飾。裂解緩沖液能使RNA從FFPE組織樣本中有效釋放,并防止進(jìn)一步的RNA降解。經(jīng)優(yōu)化的條件能純化得到所有可用的RNA,使用RNeasy FFPE Kit從FFPE樣本中得到的RNA的產(chǎn)量比其他方法更高。
操作流程
整個RNeasy FFPE操作流程可在85分鐘內(nèi)完成。使用蛋白酶K裂解樣本僅需15分鐘。裂解后,樣本在80?C下孵育15分鐘。之后,用DNase處理能有效去除樣本中的基因組DNA,包括小的DNA 片段。zui后,使用RNeasy MinElute離心柱即可收集純化的RNA,洗脫體積14–30 ?l。純化過程可在QIAcube*上全自動進(jìn)行。
應(yīng)用
RNeasy FFPE Kit可純化FFPE 樣本中所有大于70 nt RNA,得到適用于RT-PCR等眾多下游應(yīng)用的RNA 片段。但是,從FFPE樣本中純化得到的RNA會嚴(yán)重片段化,不能用于需要完整RNA的下游應(yīng)用。如果使用片段化RNA可能需要做些修飾(例如在RT-PCR時設(shè)計(jì)小的擴(kuò)增子)。進(jìn)行cDNA合成時,不能使用oligo-dT引物,而要使用隨機(jī)或基因特異性引物。
(產(chǎn)品咨詢:/)
技術(shù)參數(shù):
特點(diǎn) | 參數(shù) |
---|---|
Applications | PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray |
Elution volume | 14–30 ?l |
Format | Spin column |
Main sample type | FFPE tissue samples |
Processing | Manual (centrifugation), automated (QIAcube) |
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein | RNA |
Sample amount | 1*5 ?m to 4*10?m sections |
Technology | Silica technology |
Time per run or per prep | 70 minutes |
Yield | Varies |
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【聯(lián) 系 人】全國東
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