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所 在 地上海市
更新時間:2016-04-02 22:30:18瀏覽次數(shù):547次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線人腦瘤具體操作
取出凍存管: 根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號。
從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時核對管外的編號。
初學(xué)者易犯錯誤:水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃。
水浴鍋內(nèi)凍存管太多,導(dǎo)致傳熱不佳,使融化時間延長。
離心前忘記平衡,導(dǎo)致離心機(jī)損壞和細(xì)胞丟失。
一次復(fù)蘇細(xì)胞過多,忘記更換吸頭和吸管,導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染。
實驗前準(zhǔn)備:將水浴鍋預(yù)熱至37℃
人腦瘤用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。
在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶 等。
迅速解凍:
迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化。
.約-2min后
凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺內(nèi)。
平衡離心:用架盤天平平衡后,放入離心機(jī)中3000r/min 離心3min
制備細(xì)胞懸液:吸棄上清液。
向離心管內(nèi)加入0ml培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液。
活化與細(xì)胞復(fù)蘇 收到細(xì)胞株包裹時, 請檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形, 若有請立即通知。細(xì)胞株請盡速開始培養(yǎng), 或立即冷凍保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。
細(xì)胞復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-96℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對細(xì)胞造成損害。
細(xì)胞計數(shù):細(xì)胞濃度以5×05/ml為宜。
培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(或者24-48小時)后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時間由細(xì)胞情況而定。
公司其他銷量大產(chǎn)品信息:007 健那綠/真那氏綠/詹納斯綠B/健那綠B/雙氮嗪綠/詹姆斯綠B/煙魯綠/3-(二乙基氨基)-7-[[4-(二甲基氨基) 基]偶氮]-5- 基吩嗪翁&化物/杰油綠B /Januˊs green B FMP,65% 克 869-83- 869-83-健那綠 健那綠 Januˊs green B
007 刃天青/刃天青鈉/樹脂天青/天蘭化鈉/偶氮 四酚/樹脂酚天青/Resazurin sodium salt FMP,75%,有害品 6758-3-8 6758-3-8刃天青 刃天青 Resazurin sodium salt
0073 天青II/天青A/蔚藍(lán)II/3-氨基-7-二甲基氨基吩噻嗪-5-鎓&化物/7-(二甲基)-3-亞胺基-3H-分噻嗪鹽suan"/Azure II BS 53-53-3 53-53-3天青II 天青II Azure II
高純,70%
0074 天青I/天青B/亞甲天青/蔚藍(lán)I/亞甲基天青/氮雜脲I /Azure B BS 53-55-5 53-55-5天青I 天青I zure B
高純,70%
0074- 天青II曙紅/Azure II eosin IND 0克 5309-85-6 5309-85-6天青II曙紅 天青II曙紅 Azure II eosin
0075 橙黃G6/金橙G/桔黃G/橙黃GG/suan"性耐光桔黃/suan"性橙0/橙黃G鈉/- 基偶氮--萘酚-6,8-二磺suan"鈉/耐光橙G/橙黃G/7-羥基-8-( 基偶氮基)-,3-萘二磺suan"二鈉鹽/Orange G6 高純,80% 0克 936-5-8 936-5-8橙黃G6 橙黃G6 Orange G6
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