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更新時(shí)間:2016-04-07 20:31:25瀏覽次數(shù):748次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 環(huán)保在線小鼠成纖維細(xì)胞人胚膀胱組織來(lái)源細(xì)胞在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)的懸浮期.此時(shí),細(xì)胞質(zhì)回縮,胞體呈圓球形.然后細(xì)胞貼附于載體表面,稱貼壁,懸浮期結(jié)束. 細(xì)胞貼壁速度與細(xì)胞種類,培養(yǎng)基成分,載體的理化性質(zhì)等密切相關(guān)。一般情況下,原代培養(yǎng)細(xì)胞貼壁速度慢,可達(dá)0-24 小時(shí)或更多,而傳代細(xì)胞系貼壁速度快,通常0-30 分鐘即可貼壁。細(xì)胞貼壁后還需經(jīng)過(guò)一個(gè)潛伏階段,才進(jìn)入生長(zhǎng)和增殖期.原代培養(yǎng)細(xì)胞潛伏期,約24-96 小時(shí)或更長(zhǎng),連續(xù)細(xì)胞系和腫瘤細(xì)胞潛伏期短,僅需6-24 小時(shí)。
細(xì)胞指數(shù)增生期(logarithmic growth phase) 這是細(xì)胞增殖zui旺盛的階段,分裂相細(xì)胞增多。指數(shù)增生期細(xì)胞分裂相數(shù)量可作為判定細(xì)胞生長(zhǎng)是否旺盛的一個(gè)重要標(biāo)志。通常以細(xì)胞分裂相指數(shù)(Mitotic index,MI)表示,即細(xì)胞群中每000 個(gè)細(xì)胞中的分裂相數(shù)。一般細(xì)胞的分裂指數(shù)介于0.%-0.5%,原 代細(xì)胞分裂指數(shù)較低,而連續(xù)細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞分裂相指數(shù)可高達(dá)3%-5%。小鼠成纖維細(xì)胞指數(shù)增生期的細(xì)胞是細(xì)胞活力時(shí)期,是進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)*時(shí)期,也是凍存細(xì)胞的時(shí)機(jī)。在接種細(xì)胞數(shù)量適宜情況下,指數(shù)增生期持續(xù)3-5 天后,隨著細(xì)胞數(shù)量不斷增多、生長(zhǎng)空間減少,zui后細(xì)胞相互接觸匯合成片。
正常細(xì)胞相互接觸后能抑制細(xì)胞運(yùn)動(dòng),這種現(xiàn)象稱接觸抑制現(xiàn)象(contact inhibition)。而惡性腫瘤細(xì)胞無(wú)接觸抑制現(xiàn)象,能繼續(xù)移動(dòng)和增殖,導(dǎo)致細(xì)胞向三維空間擴(kuò)展,使細(xì)胞發(fā)生堆積(piled up)。細(xì)胞接觸匯合成片后,雖然發(fā)生接觸抑制,但只要營(yíng)養(yǎng)充分,細(xì)胞仍能進(jìn)行增殖分裂,因此細(xì)胞數(shù)仍然在增多。但是,當(dāng)細(xì)胞密度進(jìn)一步增大,培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)成分減少,代謝產(chǎn)物增多時(shí),細(xì)胞因營(yíng)養(yǎng)枯竭和代謝產(chǎn)物的影響,導(dǎo)致細(xì)胞分裂停止,這種現(xiàn)象稱密度抑制現(xiàn)象(Density Inhibition)。
培養(yǎng)細(xì)胞注意事項(xiàng):
實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,無(wú)菌室及無(wú)菌操作臺(tái)(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面,并開(kāi)啟無(wú)菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)0分鐘后,才開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株,且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后,將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái),以70%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無(wú)菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)0分鐘以上后,再進(jìn)行下一個(gè)細(xì)胞株之操作。
無(wú)菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時(shí)放置,其它實(shí)驗(yàn)用品用完即應(yīng)移出,以利于氣流之流通。實(shí)驗(yàn)用品以70%ethanol擦拭后才帶入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在抬面之無(wú)菌區(qū)域,勿在邊緣之非無(wú)菌區(qū)域操作。
小心取用無(wú)菌之實(shí)驗(yàn)物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開(kāi)之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開(kāi)后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。
工作人員應(yīng)注意自身之安全,須穿戴實(shí)驗(yàn)衣及手套后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對(duì)于來(lái)自人類或是病毒感染之細(xì)胞株應(yīng)特別小心操作,并選擇適當(dāng)?shù)燃?jí)之無(wú)菌操作臺(tái)(至少ClassⅡ)。操作過(guò)程中,應(yīng)避免引起aerosol之產(chǎn)生,小心毒性藥品,例如DMSO及TPA等,并避免尖銳針頭之傷害等。
公司其他類型產(chǎn)品信息:08- 茜素黃R鈉鹽/對(duì)硝基 偶氮水楊suan"鈉/茜草素黃R鈉鹽/Alizarin yellow R sodium salt IND 78-34-9 78-34-9茜素黃R鈉鹽 茜素黃R鈉鹽 Alizarin yellow R sodium salt
50克
09 suan"性茜素藍(lán)B/媒染藍(lán)B/3-[(5-&--羥基 基)偶氮]-4,5-二羥基-,7-萘二磺suan"二鈉鹽/媒介藍(lán)3/鉻藍(lán)SE/suan"性鉻深蘭/鉻蘭SE/suan"性媒介溶藍(lán)/suan"性鉻深藍(lán)/suan"性媒介深藍(lán)/Acid alizarin blue B 色固 058-9-0 058-9-0suan"性茜素藍(lán)B suan"性茜素藍(lán)B Acid alizarin blue B
09- 堿藍(lán)6B/堿性藍(lán)6B/六藍(lán)光堿染天藍(lán)/堿性天藍(lán)/堿蘭6B/suan"性藍(lán)9/[[4-[羥基雙(4- 胺基 基)甲基] 基]氨基] 磺suan"鈉鹽/Alkali blue 6B IND 0克 34-80-7 34-80-7堿藍(lán)6B 堿藍(lán)6B Alkali blue 6B
500克
00 偶氮&膦Ⅰ/偶氮&磷Ⅰ/-(4-&--膦suan"基 偶氮)-,8-二羥基萘-3,6-二磺suan"一鈉鹽/3-[(4-&--膦酰 基)偶氮]-4,5-二羥基-,7-萘二磺suan"二鈉鹽/CPA-I 顯色劑 克 8556-96- 8556-96-偶氮&膦Ⅰ 偶氮&膦Ⅰ CPA-I
0 偶氮&膦Ⅲ/偶氮&磷Ⅲ/&膦suan"偶氮III/,7-雙(4-&--膦羧 偶氮)-,8-二羥基萘-3,6-二磺suan"/CPA-Ⅲ 顯色劑 克 94-99-4 94-99-4偶氮&膦Ⅲ 偶氮&膦Ⅲ CPA-Ⅲ
0- 偶氮&膦Ⅳ/偶氮&磷Ⅳ/CPA-Ⅳ 高純 克 偶氮&膦Ⅳ 偶氮&膦Ⅳ CPA-Ⅳ
0 偶氮&膦mA/-(4-&--膦suan"基 偶氮)-7-(3-乙?;?偶氮)-,8-二羥基萘-3,6-二磺suan"/CPA-mA 顯色劑 克 8667-87-5 8667-87-5偶氮&膦mA 偶氮&膦mA CPA-mA
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