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豬血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒

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更新時(shí)間:2017-07-01 18:41:32瀏覽次數(shù):536次

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豬血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒的基本原理就是將抗原抗體固定到特定的載體上進(jìn)行反應(yīng),并通過(guò)酶催化底物發(fā)生化學(xué)變化將抗原抗體反應(yīng)通過(guò)顏色的形式顯現(xiàn)出來(lái)。

1)將抗原抗體反應(yīng)固相化:即試驗(yàn)中的包被環(huán)節(jié),使抗原或抗體吸附于固相載體表面。其機(jī)制可能是聚苯乙烯表面間的疏水基團(tuán)可以無(wú)選擇性地吸附蛋白分子。此物理性吸附不破壞蛋白分子結(jié)構(gòu),保持其生物學(xué)特性和免疫學(xué)活性;

2)封閉:固相吸附蛋白是非特異性的,在包被目的免疫蛋白后,未吸附蛋白的固相表面仍然有吸附其它蛋白的能力,為了保障抗原抗體反應(yīng)的特異性,因此,包被剩余的固相表面應(yīng)該用抗原抗體反應(yīng)無(wú)關(guān)蛋白封閉。一般認(rèn)為牛血清白蛋白是zui為理想的封閉劑,也可用脫脂奶粉、明膠、牛血清替代。

3)抗原抗體反應(yīng):抗原或抗體在適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)下可進(jìn)行特異的抗原抗體反應(yīng)。 4)酶反應(yīng):酶可以通過(guò)共價(jià)鍵與抗原或抗體連接形成結(jié)合物,當(dāng)抗原抗體反應(yīng)的時(shí)候,被檢測(cè)靶目標(biāo)中也結(jié)合了酶分子。

5ELISA試劑盒底物反應(yīng):結(jié)合在抗原抗體中的酶分子,可以促使底物發(fā)生顏色反應(yīng),檢測(cè)人員可以裸眼觀察,可以通過(guò)顏色來(lái)判定是否有免疫反應(yīng)的存在,通過(guò)顏色的深淺判斷標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的含量,也可借用酶標(biāo)儀在適當(dāng)?shù)牟ㄩL(zhǎng)讀取吸光度值。

豬血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒的優(yōu)勢(shì):

全面——混合8種不同的常見(jiàn)抗原,對(duì)自身免疫性疾病進(jìn)行全面篩查。                    

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準(zhǔn)確——ELISA檢測(cè)方法,靈敏度高,特異性強(qiáng),適用性好。                     

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標(biāo)本/陰性對(duì)照比值

豬血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒KIT在實(shí)驗(yàn)條件(包括)較難保證恒定的情況下,這種判斷法較為合適。在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的A值后,計(jì)算S/N值。也有寫(xiě)作P/N的,這里的P不代表陽(yáng)性(positive),而是病人(patient)的縮寫(xiě),不應(yīng)誤解。為避免混淆,更宜用S/N表示。在早期的間接法ELISA中,有些作者定出S/N為陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn),現(xiàn)多為各種測(cè)定所沿用。實(shí)際上每一測(cè)定系統(tǒng)應(yīng)該用實(shí)驗(yàn)求出各自的S/N的閾值。更應(yīng)注意的是,N所代表的陰性對(duì)照是不含受檢物質(zhì)的人血清。有的盒中所設(shè)陰性對(duì)照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液,以致反應(yīng)后產(chǎn)生的本底可能較正常人血清的本底低得多。因此,這類盒規(guī),如N<0.05(或其他數(shù)值),則按0.05計(jì)算,否則將出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。

 

洗滌板:可以說(shuō)在ELISA操作中,洗滌是zui主要的關(guān)鍵技術(shù)。因?yàn)榫郾揭蚁┑人芰蠈?duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的,為達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的,豬血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒KIT清除殘留在板孔中游離的物質(zhì),以及非特異性地吸附的干擾物質(zhì),在洗滌時(shí)又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來(lái)。所以在洗板時(shí)會(huì)有一定誤差,人為因素很大(當(dāng)然有條件的用洗板機(jī)除外),洗的不*或串了孔,對(duì)如此靈敏的ELISA系統(tǒng)可是不小的影響。

豬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒

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