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大鼠Dickkopf相關(guān)蛋白1(DKK1)ELISA試劑盒

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品       牌

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更新時(shí)間:2019-04-16 09:23:51瀏覽次數(shù):867次

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大鼠Dickkopf相關(guān)蛋白1(DKK1)ELISA試劑盒試劑準(zhǔn)備:

1.標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:

500pg/ml

(6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)

原倍濃度不用稀釋直接加入50ul

250pg/ml

(5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)

100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

125pg/ml

(4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)

100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

62.5pg/ml

(3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)

100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

31.2pg/ml

(2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)

100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

15.6pg/ml

(1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)

100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

0pg/ml

(空白對照)

原倍濃度不用稀釋直接加入50ul

2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

大鼠Dickkopf相關(guān)蛋白1(DKK1)ELISA試劑盒的操作流程:

1.在各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品各100μL,37孵育90分鐘;

2.加入100μL 生物素化抗體工作液,37孵育60分鐘;

3.洗滌3次;

4.加入100μL酶結(jié)合物工作液,37孵育30分鐘;

5.洗滌5次;

6.加入90μL底物溶液,37孵育15分鐘左右;

7.加入50μL終止液,立即在450nm波長處測量OD值;

8.結(jié)果計(jì)算。

大鼠Dickkopf相關(guān)蛋白1(DKK1)ELISA試劑盒的結(jié)果判斷與分析:

1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的LAM標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的LAM含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度,再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
3、檢測值范圍:0-480ng/ml
4、敏感度:0.1ng/ml

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