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公司是*的ATCC細胞供應(yīng)商，提供 tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞（B類）；Pan02-CAG-tTA-4B3
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細胞名稱 tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞（B類）；Pan02-CAG-tTA-4B3
形態(tài)特性  多角
生長特性 貼壁生長
特征特性  轉(zhuǎn)染pCAG-tTA質(zhì)粒，經(jīng)2.0ug/ml puromycin篩選，為Tet-off穩(wěn)定調(diào)控細胞系，受Dox調(diào)控倍數(shù)在20~50倍。細胞倍增時間為24小時。
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  5%FBS + 2.0ug/ml puromycin
傳代方法  1:4傳代，2~3天傳代一次。
傳代情況
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR  -
同工酶
染色體
 
使用權(quán)限 B類培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境：首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境，即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。

2、營養(yǎng)物質(zhì)：細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH：細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
8(KLK8)ELISA試劑盒 * ，英文名： KLK8 ELISA Kit
7(KLK7)ELISA試劑盒 進口分裝 ，英文名： KLK7 ELISA Kit
6(KLK6)ELISA試劑盒 進口原裝 ，英文名： KLK6 ELISA Kit
5(KLK5)ELISA試劑盒 * ，英文名： KLK5 ELISA Kit
4(KLK4)ELISA試劑盒 * ，英文名： KLK4 ELISA Kit
 
3(KLK3)ELISA試劑盒 進口分裝 ，英文名： KLK3 ELISA Kit
2(KLK2)ELISA試劑盒 進口原裝 ，英文名： KLK2 ELISA Kit
15(KLK15)ELISA試劑盒 * ，英文名： KLK15 ELISA Kit
14(KLK14)ELISA試劑盒 * ，英文名： KLK14 ELISA Kit
13(KLK13)ELISA試劑盒 進口分裝 ，英文名： KLK13 ELISA Kit
12(KLK12)ELISA試劑盒 進口原裝 ，英文名： KLK12 ELISA Kit
11(KLK11)ELISA試劑盒 * ，英文名： KLK11 ELISA Kit
10(KLK10)ELISA試劑盒 * ，英文名： KLK10 ELISA Kit
1(KLK1)ELISA試劑盒 進口分裝 ，英文名： KLK1 ELISA Kit
激素敏感性脂肪酶(LIPE)ELISA試劑盒 進口原裝 ，英文名： LIPE ELISA Kit
激活素受體樣激酶1(ALK1)ELISA試劑盒 * ，英文名： ALK1 ELISA Kit
激活素B(ACVB)ELISA試劑盒 * ，英文名： ACVB ELISA Kit
激活素A受體ⅡA(ACVR2A)ELISA試劑盒 進口分裝 ，英文名： ACVR2A ELISA Kit
激活素A受體Ⅰ(ACVR1)ELISA試劑盒 進口原裝 ，英文名： ACVR1 ELISA Kit
激活素AB(ACVAB)ELISA試劑盒 * ，英文名： ACVAB ELISA Kit
激活素A(ACVA)ELISA試劑盒 * ，英文名： ACVA ELISA Kit
激活蛋白C(APC)ELISA試劑盒 進口分裝 ，英文名： APC ELISA Kit
激活STAT蛋白抑制因子1(PIAS1)ELISA試劑盒 進口原裝 ，英文名： PIAS1 ELISA Kit
畸胎瘤衍生生長因子1(TDGF1)ELISA試劑盒 * ，英文名： TDGF1 ELISA Kit
基質(zhì)重塑關(guān)聯(lián)蛋白8(MXRA8)ELISA試劑盒 * ，英文名： MXRA8 ELISA Kit
基質(zhì)重塑關(guān)聯(lián)蛋白5(MXRA5)ELISA試劑盒 進口分裝 ，英文名： MXRA5 ELISA Kit
基質(zhì)細胞衍生因子4(SDF4)ELISA試劑盒 進口原裝 ，英文名： SDF4 ELISA Kit
基質(zhì)細胞衍生因子2(SDF2)ELISA試劑盒 * ，英文名： SDF2 ELISA Kit
基質(zhì)細胞衍生因子1(SDF1)ELISA試劑盒 * ，英文名： SDF1 ELISA Kit
基質(zhì)抗原3(STAG3)ELISA試劑盒 進口分裝 ，英文名： STAG3 ELISA Kit
基質(zhì)抗原2(STAG2)ELISA試劑盒 進口原裝 ，英文名： STAG2 ELISA Kit
基質(zhì)抗原1(STAG1)ELISA試劑盒 * ，英文名： STAG1 ELISA Kit
基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)ELISA試劑盒 * ，英文名： MMP9 ELISA Kit
基質(zhì)金屬蛋白酶8(MMP8)ELISA試劑盒 進口分裝 ，英文名： MMP8 ELISA Kit
基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP7)ELISA試劑盒 進口原裝 ，英文名： MMP7 ELISA Kit
基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP3)ELISA試劑盒 * ，英文名： MMP3 ELISA Kit
基質(zhì)金屬蛋白酶28(MMP28)ELISA試劑盒 * ，英文名： MMP28 ELISA Kit
基質(zhì)金屬蛋白酶27(MMP27)ELISA試劑盒 進口分裝 ，英文名： MMP27 ELISA Kit
基質(zhì)金屬蛋白酶26(MMP26)ELISA試劑盒 進口原裝 ，英文名： MMP26 ELISA Kit
基質(zhì)金屬蛋白酶24(MMP24)ELISA試劑盒 * ，英文名： MMP24 ELISA Kit
基質(zhì)金屬蛋白酶23B(MMP23B)ELISA試劑盒 * ，英文名： MMP23B ELISA Kit
基質(zhì)金屬蛋白酶23A(MMP23A)ELISA試劑盒 進口分裝 ，英文名： MMP23A ELISA Kit
基質(zhì)金屬蛋白酶21(MMP21)ELISA試劑盒 進口原裝 ，英文名： MMP21 ELISA Kit