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上海莼試生物技術(shù)有限公司

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抗補(bǔ)體備解素小鼠雜交瘤細(xì)胞;2D5
抗補(bǔ)體備解素小鼠雜交瘤細(xì)胞;2D5
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更新時間:2017-06-12 11:28:27瀏覽次數(shù):483

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【簡單介紹】
抗補(bǔ)體備解素小鼠雜交瘤細(xì)胞;2D5,采用干冰保存運(yùn)輸收到細(xì)胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。

細(xì)胞名稱 抗補(bǔ)體備解素小鼠雜交瘤細(xì)胞;2D5
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性  可產(chǎn)生單克隆抗體,抗原為補(bǔ)體備解素。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  保持細(xì)胞密度在1×105~1×106 cells/ml之間,每周換液2~3次
傳代情況 不詳
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR  -
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
抗補(bǔ)體備解素小鼠雜交瘤細(xì)胞;2D5實(shí)驗(yàn)方法和步驟 
(一) 前處理 用臺稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。 
(二) 取材 注射4小時后,將動物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。 
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點(diǎn)時間。
 (四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時間以上述相同。
 (五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細(xì)胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細(xì)胞均勻分散,在酒精燈火焰上來回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

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ATP6V1B2 英文名稱: ATP6V1B2蛋白抗體  0.2ml
ATPIF1 英文名稱: ATPIF1蛋白抗體  0.2ml
Attractin 英文名稱: Attractin蛋白抗體  0.2ml
Phospho-Aurora B(Tyr12) 英文名稱: 磷酸化有絲分裂激酶B抗體  0.1ml
ARPM1 英文名稱: 肌動蛋白相關(guān)蛋白M1抗體  0.2ml
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phospho-beta Actin (Tyr53) 英文名稱: 磷酸化β-肌動蛋白抗體  0.1ml
phospho-beta 2 Adrenergic Receptor (Ser346) 英文名稱: 磷酸化腎上腺素能受體β2/β2-AR 抗體  0.1ml
phospho-beta 2 Adrenergic Receptor (Ser355 + Ser356) 英文名稱: 磷酸化腎上腺素能受體β2/β2-AR抗體  0.1ml
APOD 英文名稱: 載脂蛋白D抗體  0.2ml
ASIC1/BNaC2/ASIC1A 英文名稱: 酸敏感離子通道1抗體  0.1ml
ADAR1 (C-terminus) 英文名稱: 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體(C端)  0.2ml
AF10 英文名稱: 髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗體  0.1ml
ADCY1 英文名稱: 腺苷酸環(huán)化酶1抗體  0.2ml
APC 英文名稱: 腺瘤樣息肉抗體  0.1ml
AGPAT1 英文名稱: 溶血磷脂酰基轉(zhuǎn)移酶抗體  0.2ml
ANKS3 英文名稱: 錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體  0.2ml
phospho-ALK (Tyr1586) 英文名稱: 磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體  0.1ml
ACADVL 英文名稱: ?;摎涿负荛L鏈抗體  0.2ml

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