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江蘇肯爾菲實驗儀器貿(mào)易有限公司
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更新時間：2024-09-20 12:12:36瀏覽次數(shù)：60
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一滴血做流式，選擇guava微流式技術(shù)
超微量樣本檢測T淋巴細胞亞群變化
常規(guī)流式實驗至少需要100μl 樣品（1×106個細胞）完成一次檢測，無法滿足“一滴血做流式"的需要。
默克密理博的“guava微流式技術(shù)"成功突破此瓶頸，以10μl超微量上樣量（1×105個細胞）
完成常見流式細胞學實驗。不僅大大節(jié)省了細胞量、藥物、抗體，也有效地降低了實驗者工作負擔。
現(xiàn)在，以常規(guī)樣品量（100μl）至少可以完成10次實驗，從而開拓新實驗設(shè)計思路，加速科研成果的誕生！
“使用(Guava)流式細胞儀使得樣本量減少90%以上，同時每份樣本的檢測時間從120s降低至10s"。
——Bruce K. Patterson 個展開個體化治療研發(fā)的
Invirion診斷公司與Evanston西北健康公司和斯坦福大學醫(yī)學院的一項以宮頸癌檢測的聯(lián)合研究報告中提到（見文獻）
“目前為止，很少有研究者對同一只小鼠進行縱向的疾病進程跟蹤研究，這是因為傳統(tǒng)的流式細胞儀
無法支持超微樣本量的檢測。Guava微流式細胞分析儀使得對慢性免疫疾病發(fā)展進行縱向跟蹤的實驗設(shè)計成為現(xiàn)實" 。
——美國運動醫(yī)學專家，MED SCI SPORT EXER雜志評委，
休斯頓大學生理學教授Dr. McFarlin在Immunology Method發(fā)表論文提到。（見文獻）
以較為常見的T淋巴細胞亞群檢測為例
T淋巴細胞亞群在許多臨床疾病中可發(fā)生異常改變，特別是免疫功能受損的病人。測定T淋巴細胞亞群變化
對了解疾病的發(fā)病機制、指導臨床治療、控制疾病的發(fā)生發(fā)展均有重要意義。根據(jù)不同的表面標志物可以
對T細胞進行分群，其中CD3+/CD4+為輔助性T細胞，CD3+/CD8+為殺傷性T細胞。使用流式細胞儀和熒
光標記抗體，可以對人全血標本中T細胞CD3/CD4進行分群和計數(shù)。
實驗流程
在96孔板中加入10ul CD8-FITC/CD4-PE/CD3-PECY5 預混試劑，或者根據(jù)抗體說明書加入相應體積抗體；
在每孔中加入10ul抗凝全血（約1×105細胞）；
用槍頭上下吹打混勻試劑和全血（確保沒有血樣粘附在孔壁上影響實驗結(jié)果）；
室溫（18-25℃）避光孵育20min；
每孔中加入180ul 1X Lysing Solution或相應體積的裂解試劑；
立即用槍頭上下吹打混勻每孔；
室溫（18-25℃）避光孵育15min；
盡快用流式細胞儀獲取結(jié)果（3h內(nèi)進行檢測）
結(jié)果可見：通過CD3,CD4,CD8的檢測指標對全血樣本中T淋巴細胞進行正確區(qū)分，并同時報告Th細胞和Tc細胞的計數(shù)結(jié)果。
證明10μl的樣本借助“guava微流式"技術(shù)同樣能夠完成流式檢測，并且所獲得的數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計學意義，準確區(qū)分了T淋巴細胞各個亞群。
*引用對應文獻
1 Polina, R., et al., Rapid, high throughput determination of cervical cytology specimen adequacy using a capillary-based cytometer.
Cytometry B Clin Cytom, 2008. 74(2): p. 133-6.
2 Breslin., W.L., et al., Mouse blood monocytes: Standardizing their identification and analysis using CD115
.Journal of Immunological Methods, 2011.
