RNase Away 即用型強(qiáng)力 RNase 滅活劑

保存條件：室溫 6 個月。
產(chǎn)品介紹：
RNaseAway 主要用來清除實(shí)驗(yàn)器具表面 RNA 酶。它含有數(shù)種抑制 RNA 酶成份，可以有效的清除包括操作臺，玻璃表面，塑料表面等處的 RNA 酶污染。
注意事項(xiàng)：
1. RNaseAway 環(huán)境溫度低時可能會析出渾濁或者沉淀，可在 37℃水浴加熱幾分鐘，即可恢復(fù)澄清，不要劇烈搖晃，以免形成過量的泡沫。
2. 避免試劑長時間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化、PH 值變化影響使用效果，各溶液使用后應(yīng)及時蓋緊蓋子。
3. RNaseAway 有腐蝕性，操作時候應(yīng)該戴手套，并且避免用于某些易腐蝕的金屬表面。
操作步驟：
1.塑料和玻璃容器加入足夠 RNaseAway 到容器中，使所有的待處理容器表面都充分接觸到 RNaseAway（可以傾斜，顛倒或者抓著容器打旋轉(zhuǎn)來幫助待處理表面都接觸到 RNaseAway，如果是離心管，可以渦旋振蕩 1min），10min 后，棄RNaseAway，用高壓滅菌水/DEPC 處理水充分淋洗后晾干（注意避免使用 RNase 污染的水淋洗或者操作不慎引
入二次污染）。
2.工作臺面
直接將 RNaseAway 噴灑在工作臺面并用紙巾擦拭均勻，10min 后用干凈紙巾擦去表面 RNaseAway，然后用高壓滅菌水淋洗后，用新的干凈紙巾擦干。
3.實(shí)驗(yàn)設(shè)備
將 RNaseAway 小心倒在紙巾上，用潤濕了 RNaseAway 的紙巾擦洗實(shí)驗(yàn)設(shè)備表面（小的實(shí)驗(yàn)設(shè)備部件可以短暫浸泡在 RNaseAway），10 min 后用干凈紙巾擦去表面 RNaseAway，然后用高壓滅菌水淋洗后，自然風(fēng)干或者用新的干凈紙巾擦干。

一、模板DNA：PCR反應(yīng)需要模板DNA，如從細(xì)胞、組織、血液中提取DNA等；

二、引物：PCR反應(yīng)的兩個引物，分別與模板DNA的兩端配對擴(kuò)增所需的特定區(qū)域，引物也可以合成為TA克隆等過程中使用到的引物；

三、dNTPs：PCR反應(yīng)中需要四種dNTPs，包括脫氧腺苷酸（dATP）、脫氧胸苷酸（dCTP）、脫氧鳥苷酸（dGTP）、脫氧胞嘧啶酸（dTTP），用于細(xì)胞分裂、DNA合成         等生物學(xué)過程，用于PCR擴(kuò)增的模板DNA鏈的延伸和擴(kuò)增；

四、Taq DNA聚合酶：PCR反應(yīng)需要的聚合酶，一般使用Taq聚合酶，還有一些其他種類的聚合酶如PFU、Phusion等，用于擴(kuò)增DNA鏈；

五、PCR buffer溶液：對PCR反應(yīng)具有緩沖作用，調(diào)節(jié)反應(yīng)pH，硫代硫酸氫鹽SDS、小分子有機(jī)化合物如甲醛，可增強(qiáng)PCR反應(yīng)特異性，從而提高反應(yīng)效率；

六、酶切體系：PCR擴(kuò)增往往涉及到重組、構(gòu)建和測序等等實(shí)驗(yàn)步驟，常常需要進(jìn)行酶切操作。

七、MARK:一種分子量標(biāo)準(zhǔn)，用來判別DNA片段大小的工具。

八、DNA純化試劑盒：用于純化PCR反應(yīng)產(chǎn)物；

①Oligo dT
選擇Oligo dT時，要求RNA必須有Poly A，所以真核生物的mRNA都適用。適合長鏈甚至全長mRNA的RT，對RNA樣品的質(zhì)量要求較高，不要有明顯的DNA污染、RNA降解和RNA斷裂。假如想探索新的mRNA進(jìn)行RT反應(yīng)，建議推薦使用Oligo dT引物。使用Oligo dT引物要比隨機(jī)引物和特異性引物的穩(wěn)定性要好。
②隨機(jī)引物
適合各種RNA的RT，尤其適合模板豐度很低的情況（比如某個gene表達(dá)量很低）。選擇隨機(jī)引物時，鏈cDNA合成反應(yīng)中就是以所有的RNA為模板，然后進(jìn)行PCR反應(yīng)時設(shè)計(jì)引物進(jìn)行特異性擴(kuò)增。同時要注意隨機(jī)引物的量和總RNA量之間的關(guān)系，一般建議每5µg總RNA的隨機(jī)引物的用量為50ng，如果每5µg總RNA的隨機(jī)引物的用量超過250ng，可能會導(dǎo)致小片段產(chǎn)物（＜500bp）的增加和長片段、全長產(chǎn)物的降低。
③特異性引物
基因特異性引物（GSP）是某個基因序列的一部分，與模板互補(bǔ)的引物。該引物需要結(jié)合目標(biāo)RNA的已知序列進(jìn)行設(shè)計(jì)。由于引物和RNA序列特異性結(jié)合，每個目標(biāo)RNA都需要一套新的基因特異性引物。因此，當(dāng)分析多種目標(biāo)時，則需要適用更多的RNA樣本。而且不同引物退火溫度本來就不相同，所以一般不推薦使用。如需要使用特異性引物，建議對退火溫度進(jìn)行優(yōu)化。