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儀器：
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀（比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測(cè)定。
紅細(xì)胞：需按照試劑盒中說(shuō)明書上紅細(xì)胞的測(cè)定方法進(jìn)行提取后測(cè)定。
動(dòng)物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測(cè)定。
培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測(cè)定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說(shuō)明書。

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測(cè)定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.加溫
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便 不時(shí)觀察，待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺，在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點(diǎn)如下：
1、快速簡(jiǎn)便：全程約50分鐘，可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn)： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則：

P3X63Ag8.653小鼠骨髓瘤細(xì)胞 Mouse myeloma cell line P3X63Ag8.653 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS多奈哌齊質(zhì)量規(guī)格：>98%Donepezil

IL12A & IL12B Protein Human 重組人 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白多尼培南(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品,一水合物Doripenem

USMC(大鼠血管平滑肌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 HAVSMC, 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞米爾貝1質(zhì)量規(guī)格：A3+A4>97%Milbemycin oxime

CM-R089大鼠皮膚肥大細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL伐地考昔質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRValdecoxib

CD14 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD14 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 胃膜素,胃粘蛋白,人胃泌素質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRGastrin I,human
滑膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)4-硝基鄰苯二甲腈(>98.0%(GC))4-Nitrophthalonitrile質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

TNFRSF11A Others Rat 大鼠 TNFRSF11A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3-硝基鄰苯二甲腈(>98.0%(GC))3-Nitrophthalonitrile質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL4,4'-雙甲氧基三苯氯DMT-CL質(zhì)量規(guī)格：>97%

293FT人胚腎細(xì)胞-用于慢病毒包裝 Human embryonic kidney cell line 293FT - for leiviral packaging 人胚腎細(xì)胞N-苯甲酰-N-苯基羥胺;鉭試劑;BPHAN-Phenylbenzohydroxamic Acid;Tantalon質(zhì)量規(guī)格：>98%;AR

IFNA14 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 蛋白 (His 標(biāo)簽)6-氯鳥嘌呤核苷6-Chloroguanosine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞;V79異蓮心堿（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Isoliensinine

GHR Others Mouse 小鼠 GHR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 蓮心堿高氯酸鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Liensinine Perchlorate

細(xì)胞凍存液CFM丁1基苯酞（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品川芎提取,液體3-Butylidenephthalide

FLT3 Others Mouse 小鼠 FLT-3 / CD135 / FLK-2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 茯苓酸（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Pachymic acid

人胃腺癌細(xì)胞;BGC-823大黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Emodin
siRNA轉(zhuǎn)染試劑腎系膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 ×105方(1ml)雙羥萘酸（標(biāo)準(zhǔn)品）Pamoic acid質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

AGER Others Human 人 AGER / RAGE 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 酚酞（標(biāo)準(zhǔn)品）Phenolphthalein質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

大鼠前列腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL香草醛（熔點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)品） Vanillin質(zhì)量規(guī)格：熔點(diǎn)測(cè)定

BRL大鼠肝細(xì)胞 Rat hepatic cells BRL DMEM+10%FBS環(huán)吡酮;環(huán)匹羅司Ciclopirox質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

IGFBP7 Protein Human 重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)環(huán)吡酮;環(huán)匹羅司(標(biāo)準(zhǔn)品)Ciclopirox質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

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