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上海雅吉生物科技發(fā)展公司

公司代理經(jīng)營(yíng)進(jìn)口品牌Amresco,sigma,R&D,IBL,RB,Santa cruz,wako,omega,ScienCell,ATCC等世界產(chǎn)品。主營(yíng)產(chǎn)品ELISA試劑盒、金標(biāo)試劑盒、放免試劑盒、細(xì)胞與細(xì)胞培養(yǎng)、血清、抗體抗原、生化試劑、各種酶類(lèi)、分子生物學(xué)試劑盒、培養(yǎng)基、實(shí)驗(yàn)室耗材、小型實(shí)驗(yàn)室儀器等。

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小鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)免疫組化試劑盒

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  • 上海雅吉生物科技發(fā)展公司
  • 2016-07-19 16:37:56
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【簡(jiǎn)單介紹】

小鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)免疫組化試劑盒 ,現(xiàn)貨供應(yīng),產(chǎn)品質(zhì)量可靠,在國(guó)內(nèi)外*,產(chǎn)品規(guī)格有50T和100T的,更多詳情請(qǐng)我公司,我們將竭誠(chéng)為您服務(wù)。

【詳細(xì)說(shuō)明】

小鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)免疫組化試劑盒 ,(更多資訊說(shuō)明書(shū)價(jià)格等請(qǐng)?jiān)斍槲夜?/span>)實(shí)驗(yàn)步驟建議方案:
石蠟包埋組織切片3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于60℃恒溫烤箱中至少烤1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次
10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無(wú)水乙醇5min,95%乙醇2 次(每次2min),85%
乙醇2 min;75%乙醇2min,自來(lái)水沖洗,ddH2O 洗2×2min;
4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說(shuō)明書(shū)*方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫
度達(dá)到98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來(lái)水沖洗,ddH2O 洗2×
2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復(fù)方法見(jiàn)附1)* 注:有些抗原勿需修復(fù),
直接進(jìn)入第5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑B,37℃濕盒孵育30 min;
6.加一抗:滴加用試劑C(即用型一抗),37℃濕盒孵育2 hr 或4℃過(guò)夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑B,37℃濕盒孵育10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的*化二抗(試劑D),37℃濕盒中孵育
30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑Tween 20,37℃濕盒孵育封閉20 min;
12.加HRP-SA: 滴加用試劑C 稀釋的試劑E(1:50~200,終濃度5~20 nM),37
℃濕盒中孵育30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應(yīng)用DAB 溶液(試劑F)顯色;
15.復(fù)染:自來(lái)水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標(biāo)本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
小鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)免疫組化試劑盒 ,注意事項(xiàng):
1. 修復(fù)后緩沖液須自然冷卻,自來(lái)水沖洗后方能把切片取出,驟冷有可能導(dǎo)致
結(jié)晶或抗原封閉。
2. 緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到,用過(guò)的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使
用。
3. 若試劑為微量濃縮液,用前應(yīng)低速離心,將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。
4. 封片前一定要換用TBS 充分洗滌,以便洗去組織上殘留的Tween 20,否則會(huì)
影響結(jié)果觀察。
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