人胚腎上皮包裝細胞 GP2-293齊一生物科技（上海）有限公司產品已被廣泛應用于化學、化工、生命科學的基礎研究和開發(fā)應用、制藥、疾病診斷與控制、人口與健康、生物技術等諸多領域.客戶遍布國內各大學、研究所、醫(yī)院、衛(wèi)生防疫、商品檢驗檢疫、制藥公司、生物技術公司和食品工業(yè)等單位.齊一生物科技（上海）有限公司：.Web:www.qiyibio。。ｃｏｍ

人胚腎上皮包裝細胞 GP2-293細胞培養(yǎng)方法 
1、收到細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快。
2、收到細胞，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題，細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況，出現此狀態(tài)時，請不要打開細胞培養(yǎng)瓶，應立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時左右，讓細胞先穩(wěn)定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理
3. 收到細胞時如無異常情況 ，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出，留下 5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)：超過80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液，1000轉/分鐘離心3分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
4，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于4℃冰箱，以備不時之需。
5 、24小時后，細胞形態(tài)已恢復并貼滿瓶壁，就可以傳代了。（貼壁細胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml  0.25%含EDTA的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般1-3分鐘，不超過5分鐘?？梢苑湃?7℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數量決定分瓶數，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。
6，貼壁細胞 ，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液，37度    5%CO2 培養(yǎng)
7.  收到細胞后，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進口胎牛血清. 剛接到細胞，若細胞不多時 血清濃度可以加到15％去培養(yǎng)。若細胞迏到80%左右 ，血清濃度還是在10％。
培養(yǎng)基參考
500ml基礎培養(yǎng)基（含：必需與非必需氨基酸、維他命、有機與無機成分、激素、生長因子與微量元素）、細胞生長添加劑、抗生素/抗菌素溶液或青霉素/鏈霉素（P/S）溶液、FBS，適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養(yǎng)箱中使用

一、細胞操作參考書
二、生長特性：貼壁    懸浮
三、細胞生長條件：
培養(yǎng)基                  90%              （GIBCO）
血清              10%  FBS（GIBCO）
溫度                       37℃
空氣條件      5% CO2，,95% AIR
生長代數    P4
凍存條件    培養(yǎng)基70%、血清20%、DMSO10%
四、組成：
組份    規(guī)格
細胞一瓶    T25
細胞培養(yǎng)與操作說明    1份
五、細胞接收后的操作流程與注意事項
1.如果細胞為貼壁細胞，，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基，培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現增殖而是繼續(xù)脫落死亡，請及時實驗室，技術人員會跟進解決
2.貼壁細胞生長緩慢：適當提高血清濃度（zui高不能超過20%），或可根據該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)
3.生長不均：貼壁細胞若出現分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)

六、細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請嚴格遵照無菌操作）
1．吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml  0.25%胰酶進行消化細胞（注意把握消化時間，通?？刂圃?-2min）
2．鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細胞漂?。┤サ粢让?，加6~8ml *培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散
3．取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當的*培養(yǎng)基，，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
4．注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存
特別注意：（如使用公共實驗室或初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng)）
1.收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間zui長不宜超過72小時）
2.貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞放置培養(yǎng)箱孵育過夜到第二天再做消化傳代
如簽收時出現培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并實驗室
└ 肺成纖維細胞總DNA
└ 支氣管上皮細胞總DNA
└ 支氣管成纖維細胞總DNA
循環(huán)系統(tǒng)
└ 心肌細胞總DNA
└ 心肌成纖維細胞總DNA
└ 主動脈內皮細胞總DNA
└ 主動脈平滑肌細胞總DNA
└ 大隱靜脈平滑肌細胞總DNA
└ 冠狀動脈平滑肌細胞總DNA
消化系統(tǒng)
└ 食管上皮細胞總DNA
└ 食管平滑肌細胞總DNA
└ 腸平滑肌細胞總DNA
└ 腸粘膜上皮細胞總DNA
└ 腸動脈內皮細胞總DNA
└ 腸靜脈內皮細胞總DNA
└ 肝實質細胞總DNA
└ 肝動脈內皮細胞總DNA
└ 肝動脈平滑肌細胞總DNA
└ 小腸血管內皮細胞總DNA
└ 小腸隱窩上皮細胞總DNA
└ 肝內膽管上皮細胞總DNA
└ 胃粘膜上皮細胞總DNA
└ 肝竇內皮細胞總DNA
腦和神經系統(tǒng)
└ 腦動脈血管內皮細胞總DNA
└ 腦動脈血管平滑肌細胞總DNA
└ 腦靜脈血管內皮細胞總DNA
└ 腦靜脈血管平滑肌細胞總DNA
└ 腦膜細胞總DNA
└ 神經元細胞總DNA
└ 神經膠質細胞總DNA
└ 海馬神經元細胞總DNA
└ 腦微血管內皮細胞總DNA
└ 腦成纖維細胞總DNA
└ 神經小膠質細胞總DNA
└ 雪旺氏細胞總DNA
骨、關節(jié)、肌肉、皮膚系統(tǒng)
└ 骨細胞總DNA
└ 滑膜細胞總DNA
└ 骨骼肌細胞總DNA
└ 表皮角化細胞總DNA
└ 真皮成纖維細胞總DNA
└ 軟骨細胞總DNA
└ 破骨細胞總DNA
└ 皮膚肥大細胞總DNA
└ 前脂肪細胞總DNA
內分泌系統(tǒng)
└ 胰島β細胞總DNA
└ 胰腺星狀細胞總DNA
└ 胰腺導管上皮細胞總DNA
└ 頜下腺上皮細胞總DNA
眼、耳、鼻、喉、口腔系統(tǒng)
└ 視網膜微血管內皮細胞總DNA
└ 小梁網細胞總DNA
└ 視網膜色素上皮細胞總DNA
└ 視網膜muller細胞總DNA
└ 虹膜色素上皮細胞總DNA
└ 晶狀體上皮細胞總DNA
└ 角膜上皮細胞總DNA
└ 角膜內皮細胞總DNA
└ 視網膜神經節(jié)細胞總DNA
血液、淋巴系統(tǒng)
Acryl-Glide wipes 即用型PAGE電泳玻璃板硅化處理試劑    /
Acrylic acid 丙烯酸    [79-10-7]
Actin 肌動蛋白    /
ADA buffer, disodium salt ADA緩沖液二鈉鹽    [41689-31-0]
ADA buffer, disodium salt ADA緩沖液二鈉鹽    [41689-31-0]
Adamantane 金剛烷    [281-23-2]
Adamantanecarboxylic Acid 1-金剛烷甲酸    [828-51-3]
1-Adamantanol 1-溴金剛烷醇    [768-95-6]
2-Adamantanol 2-金剛烷醇    [700-57-2]
2-Adamantanone 2-金剛烷酮    [700-58-3]
1-Adamantylamine hydrochloride 鹽酸金剛烷胺    [665-66-7]
Adenine 腺嘌呤    [73-24-5]
Agarose N 瓊脂糖N    [9012-36-6]
Agarose N 瓊脂糖N    [9012-36-6]
L-Alaninamide Hydrochloride L-丙氨酰胺鹽酸鹽    [33208-99-0]
Adenine 腺嘌呤    [73-24-5]
Adenine phosphate salt 腺嘌呤磷酸鹽    [70700-30-0]
Adenine sulfate 腺嘌呤硫酸鹽    [321-30-2]
Adenine sulfate 腺嘌呤硫酸鹽    [321-30-2]
Adenosine 腺嘌呤核苷    [58-61-7]
Adenosine 腺嘌呤核苷    [58-61-7]
Adenosine 腺嘌呤核苷    [58-61-7]
Adenosine-3',5'-cyclic monophosphate 腺苷3',5’環(huán)磷酸    [37839-81-9]
Adenosine deaminase 15U/mg 腺苷脫氨酶    [9026-93-1]
ADP;Adenosine-5’-diphosphate, disodium salt 5’-二磷酸腺苷二鈉鹽    [16178-48-6]
AMP;Adenosine-5’-monophosphate, free acid 5’-單磷酸腺苷    [18422-05-4]
AMP;Adenosine-5’-monophosphate, free acid 5’-單磷酸腺苷    [18422-05-4]
AMP disodium, hexahydrate ;Adenosine-5’-monophosphate, disodium, hexahydrate 5’-單磷酸腺苷二鈉鹽六水    [4578-31-8]
Agarose M 瓊脂糖M    [9012-36-6]
Agarose M 瓊脂糖M    [9012-36-6]
Azure B 天青B    [531-55-5]
AMP disodium, hexahydrate ;Adenosine-5’-monophosphate, disodium, hexahydrate 5’-單磷酸腺苷二鈉鹽六水    [4578-31-8]
ATP disodium salt, trihydrate; Adenosine 5’-triphosphate, disodium salt, trihydrate 5’-三磷酸腺苷二鈉鹽三水    [51963-61-2]
ATP disodium salt, trihydrate; Adenosine 5’-triphosphate, disodium salt, trihydrate 5’-三磷酸腺苷二鈉鹽三水    [51963-61-2]
ATP Solution(100mM) ;Adenosine 5’-triphosphate solution 100mM 5’-三磷酸腺苷二鈉溶液（100mM）    /
S-Adenosyl-L-methionine S-腺苷    [29908-03-0]
Adipic acid 己二酸    [124-04-9]
4-(2-Aminoethyl)benzenesulfonyl fluoride,hydrochloride 4-2-胺乙基苯磺酰氟鹽酸鹽    [30827-99-7]